恭喜贵州省人民医院许永杰获国家专利权
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龙图腾网恭喜贵州省人民医院申请的专利一种DNA纳米结构捕获探针侧流层析试纸条的制备及其应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116027020B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-04-29发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202310018045.0,技术领域涉及:C12Q1/68;该发明授权一种DNA纳米结构捕获探针侧流层析试纸条的制备及其应用是由许永杰;罗洁;卢志顺;达静静;余福勋;查艳设计研发完成,并于2023-01-06向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种DNA纳米结构捕获探针侧流层析试纸条的制备及其应用在说明书摘要公布了:本发明公开了一种DNA纳米结构捕获探针侧流层析试纸条的制备及其应用,属于分子生物检测领域,包含以下步骤:1)胶体金纳米粒子的合成与修饰,2)四面体纳米结构探针的制备,3)试纸条的制备,该试纸条包含样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸水垫。该试纸条生物传感器在外泌体microRNA‑150‑5p的实际检测中表现出较高的灵敏度和巨大的应用潜力。因此,所发现验证的DNA纳米结构探针提供了一种在试纸平台上构建生物传感界面的通用方法,可应用与核酸标志物检测及细胞、外泌体、蛋白和小分子等非核酸标志物检测,具有优良的应用现场分析或床旁检测前景。所构建比率计试纸条为外泌体microRNA检测提供了一种POCT型检测新方法。
本发明授权一种DNA纳米结构捕获探针侧流层析试纸条的制备及其应用在权利要求书中公布了:1.一种基于DNA纳米结构捕获探针侧流层析试纸条传感器的制备方法,其特征是,包含以下步骤:1)设计催化发夹组装发夹探针H1和H2,其中H1和H2之间的互补序列在茎部区域被封闭阻断,H2在5'末端用生物素标记,在待测靶存在下,两个发夹探针H1和H2相继解链并形成双链杂交体;2)胶体金纳米粒子的合成与修饰通过柠檬酸盐还原HAuCl4溶液,制备合成球形胶体金纳米粒子AuNPs,将AuNPs与0.5mMK2CO3溶液和2μgmL链霉亲和素混合,然后将混合物在混合器上摇动60min,在室温下加入终质量浓度为0.1%的牛血清白蛋白作为封闭剂封闭20min;再将混合物以12000rpm离心15min收集红色沉淀,即得到链霉亲和素修饰的胶体金纳米粒子SA-AuNPs;3)四面体纳米结构探针的制备针对DNA四面体四条链进行捕获探针的核酸编码设计,使捕获探针区与发夹探针H1上的部分区域序列互补;在95℃下将用于形成四面体纳米结构探针的四条链进行等摩尔量混合于缓冲液20mmTris,50mmMgCl2,pH8.0,然后冷却至4℃;4)试纸条的制备该侧流层析试纸条由四个部分组成:样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸水垫;四个组件都安装在一个共同的背衬层上;将玻璃纤维制成的样品垫浸泡在含有20mMTris-HCl、0.5%吐温-20、质量浓度2.0%的蔗糖和150mMNaClpH7.3的缓冲液中;然后,将样品垫在37℃下干燥2小时;通过将5μL链霉亲和素标记的胶体金溶液SA-AuNPs分配到玻璃纤维垫上来制备金标垫,将垫子在35℃下干燥1小时然后在4℃下储存;构建DNA四面体纳米探针传感界面,使用移液器将1μL四面体捕获探针点滴在测试区域,然后将膜在37℃下干燥1小时,再将样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸水垫组装在塑料胶背衬上,使组件间具有1-2mm重叠位置,再将组装好的板切成3毫米宽的试纸条,即可。
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