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龙图腾网恭喜北京达尔文细胞生物科技有限公司申请的专利一种关节修复蛋白组合物及其制备方法和其应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN116555174B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-04-29发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202310042910.5，技术领域涉及：C12N5/0775；该发明授权一种关节修复蛋白组合物及其制备方法和其应用是由王宇;高文勇;陈琳;李建军设计研发完成，并于2023-01-28向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种关节修复蛋白组合物及其制备方法和其应用在说明书摘要公布了：本发明涉及一种关节修复功效蛋白组合物，其制备包括如下步骤：在细胞蛋白提取物中加入20UmL‑35UmL的核酸酶或全能核酸酶的任一种或其组合，将其置于37℃±1℃条件下酶解15min‑40min，将制得的酶解液分离纯化，即得。本发明所得的细胞蛋白组合物具有细胞修复、关节修复、软骨修复的效果，用于防治关节外伤性病变、退变性骨关节病变、关节损伤、难愈性创面病变、膝关节骨性关节病变、软骨损伤的任一种或其并发症。

本发明授权一种关节修复蛋白组合物及其制备方法和其应用在权利要求书中公布了：1.一种关节修复蛋白组合物，其制备包括下述步骤：（1）在细胞蛋白提取物中加入20UmL-35UmL的核酸酶，将其置于37℃±1℃条件下酶解15min-40min，制得酶解液，将其置于2℃-4℃条件下备用；（2）在2℃-8℃条件下，将步骤（1）制得的酶解液用洗脱溶剂配置成5-15mgml后，过色谱柱，洗脱流速为0.1-1mlmin，监测并收集紫外波长为280nm的洗脱部位，即得，其中，洗脱溶剂由50mmolL磷酸盐缓冲液pH6.8中含300mmolL氯化钠组成；所述细胞蛋白提取物的制备包括如下步骤：S-1:将密度为5.0×106个mL-1.0×107个mL的间充质传代细胞置于含有DMEMF1240-50%、RPMI164040-50%、牛血清蛋白（BSA）0.1-2%、表皮细胞生长因子（EGF）1-15ugmL、成纤维细胞生长因子（FGF）1-15ugmL、胰岛素转铁蛋白1-15ugmL、复方氨基酸18AA0.01-0.1%和2-10μmolL应激物的培养基中，再将其置于37.0℃±0.5℃、5%±1.0%CO2条件下培养10h-14h后，分离，洗涤，收集细胞，其中，所述的应激物选自化合物16： ；S-2:将收集细胞按照密度为5.0×106个mL-1.0×107个mL分散于溶剂中，再将其置于2℃-8℃下超声处理，制得细胞裂解液，其中，所述溶剂选自选自生理盐水、5%葡萄糖溶液、磷酸盐缓冲液、TBPS缓冲液、TBST缓冲液、Tris缓冲液的任一种或其组合；S-3:将步骤S-2制得的细胞裂解液分离后，所得的分离液依次经0.45um、0.22um滤膜过滤，即得；所述间充质传代干细胞来源于脐带。

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