恭喜南京林业大学郑兆娟获国家专利权
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龙图腾网恭喜南京林业大学申请的专利一种提高霍氏假单胞菌5-羟甲基糠醛氧化能力的培养方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116004471B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-04-29发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202310086780.5,技术领域涉及:C12N1/20;该发明授权一种提高霍氏假单胞菌5-羟甲基糠醛氧化能力的培养方法是由郑兆娟;刘青;刘鹏;金小虎;欧阳嘉设计研发完成,并于2023-02-09向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种提高霍氏假单胞菌5-羟甲基糠醛氧化能力的培养方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种提高霍氏假单胞菌5‑羟甲基糠醛氧化能力的培养方法。以有机酸酸解石花菜获得石花菜水解液,顺序添加氧化钙和氢氧化钠调节水解液pH,离心后所得清液为培养基碳源,在此基础上添加少量廉价有机氮源及无机盐,制得石花菜酸解液培养基。该培养基成本低廉,以该培养基培养霍氏假单胞菌,所得细胞氧化5‑羟甲基糠醛的催化能力高于用昂贵碳源和氮源培养基培养的细胞。
本发明授权一种提高霍氏假单胞菌5-羟甲基糠醛氧化能力的培养方法在权利要求书中公布了:1.一种提高霍氏假单胞菌5-羟甲基糠醛氧化能力的培养方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)将石花菜粉碎后与有机酸溶液混合,高温反应,反应结束后固液分离得到石花菜酸解液;(2)调节步骤(1)得到的石花菜酸解液的pH至中性,以调节pH后的石花菜酸解液为碳源,复配有机氮源和无机盐,制备得到石花菜酸解液培养基;(3)将霍氏假单胞菌接入GMM培养基中,培养得到活化液;将活化液转接至步骤(2)制备的石花菜酸解液培养基中进一步扩大培养,收集细胞并用生理盐水清洗,经固液分离得到生物催化剂;(4)以步骤(3)制得的生物催化剂催化5-羟甲基糠醛,催化反应结束后,固液分离收集上清液,得到5-羟甲基-2-呋喃甲酸;其中,步骤(2)中,所述的石花菜酸解液培养基,其配方为,1L蒸馏水中含:pH调节后的石花菜酸解液50~200mL、有机氮源2~5g、Na2HPO40.5~3g、KH2PO40.2~1.5g、NH4Cl0~0.5g、NaCl0~0.25g、MgSO40~0.2g、0~2mL微量元素溶液,溶剂为水,pH6.0~7.5;其中,步骤(2)中,所述调节步骤(1)得到的石花菜酸解液的pH至中性,所用的中和剂为氧化钙和氢氧化钠,两种中和剂按顺序依次添加;其中,步骤(2)中,所述的有机氮源为玉米浆干粉、花生饼粉、黄豆饼粉中的任意一种或几种的组合;其中,步骤(3)中,所述的霍氏假单胞菌为霍氏假单胞菌NL2019,其保藏编号为CCTCCNO:M2021356;其中,步骤(4)中,以步骤(3)制得的生物催化剂催化5-羟甲基糠醛,其中所述的生物催化剂,其干重浓度为5~10gL;所述的5-羟甲基糠醛,其浓度为2~40gL;其中,步骤(4)中,所述的催化反应,其反应条件为:反应温度为25℃~45℃,反应pH为5.5~8.0,反应时间为0.5~10小时。
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