恭喜浙江师范大学李传康获国家专利权
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龙图腾网恭喜浙江师范大学申请的专利一种降低光漂白的超分辨显微方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119555656B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-04-11发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510119970.1,技术领域涉及:G01N21/64;该发明授权一种降低光漂白的超分辨显微方法是由李传康;卢禹先;陈达如;匡翠方设计研发完成,并于2025-01-25向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种降低光漂白的超分辨显微方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种降低光漂白的超分辨显微方法。在本发明中,两个激光器发射的光束同步投射至荧光样本上,其中一个光束经过相位调制后,在样品面上形成高强度的环形光斑;而另一光束则保持低光强的实心光斑状态。通过时间调制器件对两束光分别加载不同频率的调制,实时调控环形光束的调制对比度;此外在探测端采用光学锁相探测技术,替代传统方法中昂贵的锁相硬件设备,将信号从空间域转到频域,在获得相同空间分辨率的情况下。该方法所需的光功率更低,从而缓解成像系统对样品的光漂白性和光毒性影响。本方法无需在染料上做改动,设计简洁,操作便捷,对于生物样品的高分辨率成像具有普适性。
本发明授权一种降低光漂白的超分辨显微方法在权利要求书中公布了:1.一种降低光漂白的超分辨显微方法,其特征在于,包括以下步骤:S1.引入两束激光,对其进行功率和偏振调控,实现双光束照明;S2.通过相位调制器件,对两束激光进行空间强度调制;S3.通过时间调制器件,对两束激光进行时间调制,并且优化其调制对比度;S4.通过光学锁相探测,将信号从空间域移到频域,解调所需信号;S5.获取最佳照明光强,对样品产生荧光激发,实现低光漂白的超分辨成像;所述的功率和偏振调控包括以下步骤:S101.调节其中一束激光,使其为低功率激光,其功率为Is,将其偏振情况,调整为垂直偏振光;S102.调节另一束激光,使其为高功率激光,其功率为Id,将其偏振情况,调整为水平偏振光;S103.将两束激光合束,并通过偏振片将其调整为圆偏光,照射至样品面上;所述的空间强度调制是将高功率激光通过相位调制器件将波前调制为涡旋光;所述的时间调制是对两束激光分别加载正弦波调制f1、f2,使其光强随时间周期性变化;所述的调制对比度为,其中Imin是激发光或损耗光的光强最小值,Imax是激发光或损耗光的光强最大值;两束激光所加载调制对比度各不相同,分别为CM1和CM2,其中CM1对应正弦波调制f1和CM2对应正弦波调制f2;所述的光学锁相探测包括以下步骤:S401.将Is,Id,f1,f2,CM1,CM2视为自变量,计算荧光强度;S402.将荧光强度通过傅里叶变换,转到频域,获得各个频率分量下的值;S403.对各个频率分量下的值进行差分处理;S404.通过傅里叶逆变换,将差分的结果转到空域,获得低背景噪声的荧光量。
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