恭喜国科大杭州高等研究院王金龙获国家专利权
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龙图腾网恭喜国科大杭州高等研究院申请的专利一种基于共价结合富集含巯基肽段的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119619378B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-04-11发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510160275.X,技术领域涉及:G01N30/06;该发明授权一种基于共价结合富集含巯基肽段的方法是由王金龙;苏青梅;王小慧;孙菲菲;张晓婷设计研发完成,并于2025-02-13向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种基于共价结合富集含巯基肽段的方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种基于共价结合富集含巯基肽段的方法,该方法中使用一个可以和巯基反应的化学试剂,即2‑2‑吡啶基二硫基乙胺,该试剂包含两个功能性的反应基团,具体为氨基和吡啶二硫基,其中氨基可以和羧基磁珠反应,形成新的吡啶二硫基磁珠材料,即吡啶二硫基琼脂磁珠。吡啶二硫基可以直接和巯基肽段反应,形成共价键,这样就实现巯基肽段的富集,再通过加入还原剂比如DTT,可以将巯基肽段洗脱下来,该方法具有成本低、选择性好等特点。
本发明授权一种基于共价结合富集含巯基肽段的方法在权利要求书中公布了:1.一种基于共价结合富集含巯基肽段的方法,其特征在于,包括:步骤(1):制备吡啶二硫基琼脂糖磁珠;其中,所述制备吡啶二硫基琼脂糖磁珠的步骤包括:将羧基磁珠、N-3-二甲基氨基丙基-N'-乙基碳二亚胺盐酸盐和2-2-吡啶二硫基乙胺盐酸盐混匀,在37-42℃水浴下反应1-3小时,反应后去掉上清液,用水清洗磁珠若干次,得到吡啶二硫基琼脂磁珠;步骤(2):制备巯基肽段;其中,所述制备巯基肽段的步骤包括:在组织中加入尿素后进行研磨,研磨后进行离心处理,取离心处理后的上清液,在离心处理后的上清液中加入碳酸氢铵缓冲液和胰蛋白酶后进行酶切,以得到巯基肽段;步骤(3):将所述巯基肽段和所述吡啶二硫基琼脂磁珠孵育,利用水清洗;步骤(4):在步骤(3)中清洗后的物质中加入洗脱液后孵育,保留上清肽段;步骤(5):将所述上清肽段脱盐后冻干,进行质谱检测。
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