恭喜河南中医药大学杨怀霞获国家专利权
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龙图腾网恭喜河南中医药大学申请的专利基于多孔Au@Pd纳米核壳结构的三明治型AFB1电化学检测试剂盒及检测方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN114894848B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-04-08发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202210446804.9,技术领域涉及:G01N27/02;该发明授权基于多孔Au@Pd纳米核壳结构的三明治型AFB1电化学检测试剂盒及检测方法是由杨怀霞;刘增辉;周世瑾;宋安琪;薛金燕;刘艳菊设计研发完成,并于2022-04-26向国家知识产权局提交的专利申请。
本基于多孔Au@Pd纳米核壳结构的三明治型AFB1电化学检测试剂盒及检测方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种基于多孔Au@Pd纳米核壳结构的三明治型AFB1电化学检测试剂盒及检测方法,该试剂盒包括GCE、HAuCl4、柠檬酸三钠、MWCNTs、CMK‑3、壳聚糖、HDPC、K2PdCl4、AA、Aptamer、Antibody、Tb、MCH。本发明通过组装AuNPs、MWCNTs、CMK‑3和多孔Au@PdNPs等纳米材料,以及两个对AFB1具有强亲和力的识别元件Ab、Ap,成功制备了一个能够精确、灵敏、特异性检测AFB1的电化学检测试剂盒。在20fgmL到2ngmL的范围内,AFB1浓度的对数与电流强度呈正相关,线性方程为:IμA=9.836×10‑6×lgCAFB1+7.346×10‑6R2=0.996,检测限LOD为0.24fgmL,且重现性、选择性良好。该方法在实际样品中AFB1的检测也表现出令人满意的结果。因此,本发明方法在检测AFB1方面具有良好的应用潜力。
本发明授权基于多孔Au@Pd纳米核壳结构的三明治型AFB1电化学检测试剂盒及检测方法在权利要求书中公布了:1.一种基于多孔Au@Pd纳米核壳结构的“适配体-抗体”三明治型AFB1电化学检测试剂盒,其特征在于,包括:玻碳电极GCE、四氯金酸HAuCl4、柠檬酸三钠、多壁碳纳米管MWCNTs、有序介孔碳CMK-3、壳聚糖、氯代十六烷基吡啶一水合物HDPC、氯亚钯酸钾K2PdCl4、L-抗坏血酸AA、适配体Aptamer、抗体Ab、甲苯胺蓝Tb、6-巯基-1-己醇MCH;Aptamer的序列为5′-SH-CH26-GTTGGGCACGTGTTGTCTCTCTGTGTCTCGTGCCTTCGCTAGGCCCACA-3′;Ab为黄曲霉毒素B1多克隆抗体;所述试剂盒的组装过程,包括以下步骤:(1)将MWCNTsCMK-3AuNPs纳米复合材料滴加到GCE表面,反应;(2)将适配体Aptamer滴加到步骤(1)电极表面,反应;(3)将步骤(2)电极浸泡在MCH溶液中,反应;(4)将待测样品滴加到步骤(3)电极表面,反应;(5)将Au@PdNPs-Ab-Tb生物偶联物滴加到步骤(4)电极表面,反应;(6)将步骤(5)电极置于PBS缓冲液中测量电化学信号;MWCNTsCMK-3AuNPs纳米复合材料的制备方法为:将50mL1mMHAuCl4溶液加热至沸腾;然后加入10mL38.8mM柠檬酸三钠溶液,保持沸腾,直至溶液颜色不再变化,冷却至室温,收集得到AuNPs悬浮液;将4.8mgMWCNTs、4.8mgCMK-3和19.2mg壳聚糖分散在4mL质量分数2%醋酸溶液中,冰水浴超声处理,获得均匀分散的纳米材料混合液,最后将4mLAuNPs悬浮液加入到4mL纳米材料混合液中,并将整个混合体系继续超声处理,获得均匀分散的MWCNTsCMK-3AuNPs纳米复合材料;Au@PdNPs-Ab-Tb生物偶联物的制备方法为:①将0.1gHDPC、0.5mL10mMHAuCl4溶液和2mL10mMK2PdCl4溶液加入25mL超纯水中,在超声条件下形成均匀的混合溶液;接着将1.5mL100mMAA溶液加入到混合溶液中,反应,然后将反应产物Au@PdNPs离心洗涤,再分散于10mL超纯水中,得到Au@PdNPs悬浮液;②将20μL50μgmLAb溶液加入到1mLAu@PdNPs悬浮液中,孵育,得到Au@PdNPs-Ab共轭物溶液;随后,将3mgTb加入到Au@PdNPs-Ab共轭物溶液中,孵育;然后,离心除去未反应的抗体Ab和Tb,得到Au@PdNPs-Ab-Tb生物偶联物,用PBS缓冲液冲洗后再分散于1mLPBS缓冲液中。
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