恭喜刘国珍;余湉获国家专利权
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龙图腾网恭喜刘国珍;余湉申请的专利一种等温识别双链DNA的核酸探针及其应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115960998B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-04-08发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211615191.3,技术领域涉及:C12Q1/6844;该发明授权一种等温识别双链DNA的核酸探针及其应用是由刘国珍;余湉设计研发完成,并于2022-12-15向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种等温识别双链DNA的核酸探针及其应用在说明书摘要公布了:本发明提供了一种等温识别双链DNA的核酸探针及其应用。通过针对待测序列靶向设计对应的检测引物系列,在T4DNA连接酶扩增耦合体系中实现高度同源序列的区分和前端放大,并与磁珠偶联进行提纯,然后利用ExoIII核酸外切酶实现信号的放大和读取。本发明所述技术方案的检测灵敏度可以达到1amolL,特异性可以达到识别单个碱基的差异的核酸片段。不需要复杂昂贵的温控设备就可实现待测物在同一管中同时指数扩增和特异性高效甄别,高灵敏、准确地检测区分高度同源的基因,快速得到检测结果。本发明具有普适性,在单管实现高灵敏高特异性快速完全等温操作适用于即时检验。
本发明授权一种等温识别双链DNA的核酸探针及其应用在权利要求书中公布了:1.一种等温识别双链DNA的核酸探针,其特征在于,包括:检测体系:所述检测体系包括检测引物和检测试剂;所述检测引物为待测序列前端引物、待测序列纯化引物和待测序列后端放大引物,所述检测试剂包括T4DNA连接酶、MgOAC、缓冲液和RPA干粉;纯化磁珠:所述纯化磁珠为链霉亲和素磁珠;二次放大体系:所述二次放大体系包括ExoIII核酸外切酶和待测序列的荧光报告探针;所述前端引物碱基长度为18~24个,包括40~60%的GC含量,熔化温度50~60℃;所述纯化引物位于后端放大引物上游,与后端放大引物头尾相连无任何间隔,所述纯化引物5’端序列修饰磷酸基团,3’端序列修饰生物素且与待测序列模板互补配对;纯化引物碱基长度为18~24个,包括40~60%的GC含量,熔化温度50~60℃;所述后端放大引物具有一段互补配对片段和一段非互补配对片段;所述互补配对片段对与待测序列检测位点互补配对,碱基长度为18~24个,包括40~60%的GC含量,熔化温度50~60℃;所述非互补配对片段,无任何GC序列;长度为18~27个碱基长度;所述荧光报告探针与后端放大引物互补配对,长度为18nt;3’端为荧光基团,间隔三或四个碱基后是猝灭基团。
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