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龙图腾网恭喜上海市第十人民医院申请的专利一种基于可逆DNA自组装的组织切片靶标蛋白多重分析方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN116794290B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-04-08发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202310804196.9，技术领域涉及：G01N33/533；该发明授权一种基于可逆DNA自组装的组织切片靶标蛋白多重分析方法是由朱小立;孙奋勇;毛东升;张润驰;李文星设计研发完成，并于2023-07-03向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种基于可逆DNA自组装的组织切片靶标蛋白多重分析方法在说明书摘要公布了：本发明公开一种基于可逆DNA自组装的组织切片靶标蛋白多重分析方法，包括步骤一、DNA自组装体系的设计，步骤二、抗体Ab‑T的合成，步骤三、组织切片靶标蛋白的预处理与成像，步骤四、成像分析的图像处理；本发明将DNA自组装体系设计、点击化学反应、免疫识别、可逆DNA自组装与组织荧光成像技术结合，将组织切片上的多种靶标蛋白输出为多种荧光信号，实现对组织切片上靶标蛋白的多重分析，在不减少成像精度的前提下降低时间成本和对组织样本的需求；对于组织样本，尤其是珍贵组织样本的多靶标蛋白的空间定位关系分析、细胞分型分析、细胞的组织空间分布分析等基础科研、临床研究与应用具有重要意义。

本发明授权一种基于可逆DNA自组装的组织切片靶标蛋白多重分析方法在权利要求书中公布了：1.一种基于可逆DNA自组装的组织切片靶标蛋白多重分析方法，其特征在于，所述方法在石蜡组织切片、冷冻组织切片以及固定于成像界面的类组织样本分析中的应用，包括以下步骤：步骤一、DNA自组装体系的设计，根据用于DNA自组装的T序列及DNA去组装的D序列均不含有G碱基的准则设计DNA自组装体系；步骤二、抗体Ab-T的合成，合成可特异性启动不同DNA自组装的多组T链，之后基于点击化学，将其分别标记在第一抗体Ab上，得到多种不同的抗体Ab-T；具体方法为先将高浓度的m×n种第一抗体Ab分别与高浓度的于4℃磁力搅拌仪中进行交联反应2h，得到Ab-；随后将Ab-与T-DBCO混合，在4℃磁力搅拌仪中反应1h，然后转移到4℃环境中继续反应24h，得到m×n种抗体引体复合体Ab-T；所述磁力搅拌仪转速控制在1000-1200rpm，使用的第一抗体Ab浓度≥1mgmL，使用的的浓度为第一抗体Ab浓度的20-50倍，并使用DMSO溶解，两者反应体系为40-100μL，其中DMSO在反应体系中含量小于5%；T-DBCO为DBCO修饰的触发链T，T-DBCO与Ab-摩尔浓度比为3:1；步骤三、组织切片靶标蛋白的预处理与成像，首先对组织切片进行抗原活化处理，利用抗原-抗体免疫识别的特异性，在不同的待分析蛋白靶标上进行特异性Ab-T标记，随后对标记后的组织切片进行循环的DNA自组装成像与去组装成像；步骤四、成像分析的图像处理，通过图像对齐得到不同靶标蛋白被不同颜色标记的完整图像，利用图像处理程序分析各蛋白的亚细胞空间定位、相对位置关系、细胞分子分型、细胞间相互作用关系和细胞间空间定位关系。

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