恭喜可孚医疗科技股份有限公司黄微获国家专利权
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龙图腾网恭喜可孚医疗科技股份有限公司申请的专利一种去除重组蛋白内毒素的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115043897B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-03-25发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202210686277.9,技术领域涉及:C07K1/16;该发明授权一种去除重组蛋白内毒素的方法是由黄微;黄琪;景成宇;廖经练;刘丽霞设计研发完成,并于2022-06-16向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种去除重组蛋白内毒素的方法在说明书摘要公布了:本发明提供了一种去除重组蛋白内毒素的方法,包括步骤S1、对第一填料柱进行第一预处理;步骤S2、上样;步骤S3、去除待处理样品中的内毒素,先采用第二平衡液冲洗上样后的第一填料柱,直至流穿液280nm紫外吸收回到基线,再采用体积分数为10%‑60%的异丙醇冲洗上样后的第一填料柱,直至流穿液280nm紫外吸收回到基线,以去除待处理样品中的内毒素,获得结合在第一填料柱上的粗制蛋白;所述第二平衡液包括体积分数为0.5%‑1.25%的曲拉通X‑114。本发明将TritonX‑114与异丙醇组合使用,以提高对内毒素的去除率,且降低去除成本。
本发明授权一种去除重组蛋白内毒素的方法在权利要求书中公布了:1.一种去除重组蛋白内毒素的方法,其特征在于,包括如下步骤:步骤S1、对第一填料柱进行第一预处理先采用水冲洗第一填料柱,再采用第一平衡液冲洗第一填料柱,使得第一填料柱的pH值和电导率与第一平衡液相同;所述第一填料柱中的填料为含镍填料;所述第一平衡液包括以下浓度的组分:20-50mM的三羟甲基氨基甲烷、200-500mM的氯化钠和5-10mM的咪唑;所述第一平衡液的pH值为7.3-7.5,电导率为10-25mScm;步骤S2、上样先将待处理样品的pH值和电导率调节成与第一平衡液相同,再将调节后的待处理样品流向第一填料柱,实现二者间结合;所述待处理样品为含有组氨酸的重组蛋白溶液;步骤S3、去除待处理样品中的内毒素先采用第二平衡液冲洗上样后的第一填料柱,直至流穿液280nm紫外吸收回到基线,再采用体积分数为10%-60%的异丙醇冲洗上样后的第一填料柱,直至流穿液280nm紫外吸收回到基线,以去除待处理样品中的内毒素,获得结合在第一填料柱上的粗制蛋白;所述第二平衡液包括以下浓度和体积分数的组分:20-50mM的三羟甲基氨基甲烷、200-500mM的氯化钠、5-10mM的咪唑和体积分数为0.5%-1.25%的曲拉通X-114;还包括步骤S4、获取目标蛋白;所述步骤S4包括以下步骤:步骤S4.1、利用中间冲洗获取第一预制蛋白先采用第一平衡液冲洗结合在第一填料柱上的粗制蛋白,再采用体积分数为10%-20%的洗脱液冲洗结合在第一填料柱上的粗制蛋白,以去除杂质蛋白,获取结合在第一填料柱上的第一预制蛋白;步骤S4.2、获取第一流穿液采用洗脱液冲洗经步骤S4.1中的第一预制蛋白,收集280nm紫外吸收峰处的第一流穿液,在第一流穿液中含有第一预制蛋白;步骤S4.3、将第一流穿液经后处理获得目标蛋白。
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