恭喜江苏师范大学王颇获国家专利权
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龙图腾网恭喜江苏师范大学申请的专利无酶、免标记的DNA逻辑门的构建方法、构建结构及应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116106387B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-03-25发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211093736.9,技术领域涉及:G01N27/327;该发明授权无酶、免标记的DNA逻辑门的构建方法、构建结构及应用是由王颇;沈慧;豆保婷设计研发完成,并于2022-09-08向国家知识产权局提交的专利申请。
本无酶、免标记的DNA逻辑门的构建方法、构建结构及应用在说明书摘要公布了:本发明公开了无酶、免标记的高效DNA逻辑门的构建方法、构建结构及应用,包括构建无酶、免标记的DNA传感体系,构建AND,OR及NOR型DNA逻辑门;构建电化学传感界面,用于miRNA和甲基化DNA的多个逻辑门检测。本发明中无酶、免标记的高效DNA逻辑门,利用toehold介导的DNA链置换反应实现miRNA和甲基化DNA的精准识别,并通过原位合成银纳米簇催化还原H2O2,构建了AND,OR及NOR型逻辑门电化学传感平台,对相关疾病的早期诊断具有重要的指导意义和应用价值。
本发明授权无酶、免标记的DNA逻辑门的构建方法、构建结构及应用在权利要求书中公布了:1.无酶、免标记的DNA逻辑门的构建方法,其特征在于:所述无酶、免标记的DNA逻辑门的构建方法包括以下步骤:步骤S1:首先将固定探针IP1、固定探针IP2和辅助探针AP混合,混合后退火杂交处理得到V型复合探针VP;其中,所述固定探针IP1的序列为5ʹ-CH26-SH-TTTTTTCAATGGTGTTTG-3ʹ,所述固定探针IP2的序列为5ʹ-GGTGACAAGCGACGAAGCAGTTTTTT-CH26-SH-3ʹ,所述辅助探针AP的序列为5ʹ-CAAACACCATTGTTTTCTGCTTCGTCGCTTGTCACCACCTA-3ʹ;步骤S2:进行金电极的预处理,接着将所述V型复合探针VP固定到已经预处理后的金电极表面,并用巯基己醇MCH进行封闭得到MCHVPAuE,所述MCHVPAuE作为DNA逻辑门的传感基底;步骤S3:将miRNA、甲基化DNA与连接探针LP进行杂交,之后滴加至步骤S2得到的MCHVPAuE界面反应;其中,所述miRNA的序列为5ʹ-UCAUCGGAGCUCACACUCCA-3ʹ,所述甲基化DNA的序列为5ʹ-TAGGTGGTGACAAGCGACGAAGCAGGCTCCGATGA-3ʹ,所述连接探针LP的序列为TCATCGGAGCTCACACTCCA;步骤S4:在步骤S3界面反应完成后加入信号探针SP杂交,杂交完成后加入100μM硝酸银孵育,孵育后冲洗,冲洗完成后滴入500μM硼氢化钠原位合成银纳米簇;其中,所述信号探针SP的序列为5ʹ-CAAACACCATTGCCCCCCCCCCCC-3ʹ。
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