恭喜内蒙古农业大学刘大程获国家专利权
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龙图腾网恭喜内蒙古农业大学申请的专利一种测定酵母培养物中N-乙酰谷氨酸含量的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119375408B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-03-25发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411958213.5,技术领域涉及:G01N30/88;该发明授权一种测定酵母培养物中N-乙酰谷氨酸含量的方法是由刘大程;张小洁;徐子萱;杨岚;金山设计研发完成,并于2024-12-30向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种测定酵母培养物中N-乙酰谷氨酸含量的方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种测定酵母培养物中N‑乙酰谷氨酸含量的方法,属于化学分析技术领域,方法包括:预处理;提取;净化;标准曲线的绘制和测定,计算出待测酵母培养物样品中N‑乙酰谷氨酸的含量。本发明采用高效液相色谱‑紫外检测器对酵母培养物中N‑乙酰谷氨酸含量进行测定,适用于大多数饲料企业实验室使用,能准确测定酵母培养物中N‑乙酰谷氨酸含量,以期为进一步开发、制备酵母培养物提供参考,亦为下一步研究N‑乙酰谷氨酸在动物机体中的作用机制做铺垫,对于阐明酵母培养物的营养与保健作用机制具有重要意义。
本发明授权一种测定酵母培养物中N-乙酰谷氨酸含量的方法在权利要求书中公布了:1.一种测定酵母培养物中N-乙酰谷氨酸含量的方法,其特征在于,包括以下步骤:1预处理:将待测酵母培养物样品粉碎后过筛,备用;2提取:将甲醇分成两部分,将预处理后的待测样品和第一部分甲醇混合加热超声提取,每隔一段时间振荡混匀一次,将提取后的溶液进行离心,得到上清液,将离心后的残渣加入第二部分甲醇涡旋振荡混匀,将混合物离心,合并上清液转移至容量瓶中,合并的上清液恢复至室温后,加入氨水调节pH≥6.5,用甲醇定容,得到提取液;3净化:依次用5mL甲醇和5mL水活化固相萃取小柱,取2mL步骤2得到的提取液以流速小于1mLmin缓慢通过固相萃取小柱,用3mL体积分数为5%的氨水淋洗,抽至近干,再用3mL甲醇清洗,最后用6mL甲酸的体积分数为2%的甲酸甲醇溶液洗脱,收集洗脱液65℃水浴,待溶液蒸干后,加入2mL超纯水复溶,经0.22μm滤膜过滤,得到供试品溶液;所述固相萃取小柱为AMICROMMAX,规格:60mg3mL;4标准曲线的绘制和测定:将N-乙酰谷氨酸标准品加入超纯水溶解,配制成1mgmL的标准储备液,将标准储备液稀释成浓度分别为1、5、10、25、50、100、250、500μgmL的标准系列工作液;将标准系列工作液和供试品溶液分别采用高效液相色谱仪进行测定,高效液相色谱条件为:色谱柱:AcclaimC30;流动相:磷酸的体积分数为0.05%的磷酸水溶液和甲醇的体积比为95:5的混合溶液;流速:1.0mLmin;柱温:35℃;检测器:紫外检测器;检测波长:215nm;进样量:10μL;对标准系列工作液的目标峰进行分析得到色谱峰面积,以标准系列工作液浓度为横坐标,以标准系列工作液的色谱峰面积为纵坐标,绘制标准曲线,获得到线性回归方程,对供试品溶液目标峰进行分析得到色谱峰面积,通过线性回归方程,计算出待测酵母培养物样品中N-乙酰谷氨酸的含量。
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