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龙图腾网恭喜中国科学院广州生物医药与健康研究院;生物岛实验室申请的专利非抗体依赖的泛素化修饰富集方法和检测方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN114609306B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-03-21发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202210220908.8，技术领域涉及：G01N30/06；该发明授权非抗体依赖的泛素化修饰富集方法和检测方法是由张小飞;孙明伟;张青;邬文峰;黄秋玲设计研发完成，并于2022-03-08向国家知识产权局提交的专利申请。

本非抗体依赖的泛素化修饰富集方法和检测方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种非抗体依赖的蛋白质泛素化修饰富集方法，包括全蛋白质提取、蛋白水平自由氨基完全封闭、底物蛋白上泛素链水解、含有可富集标签试剂标记泛素化修饰位点处的自由氨基、蛋白质的酶切、标记的泛素化修饰肽段的富集。本发明还涉及检测方法，即对富集后的泛素化修饰肽段通过液相‑质谱检测。本发明不需要利用抗体识别酶切后产生的泛素残留基序，即可实现蛋白质泛素化修饰的无差别富集及鉴定。

本发明授权非抗体依赖的泛素化修饰富集方法和检测方法在权利要求书中公布了：1.一种蛋白质泛素化修饰富集方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、从待检测生物样品中提取获得全蛋白质样品：利用7-9M尿素重悬待检测样品，再通过超声进一步裂解并释放细胞或组织中全蛋白，离心后取上清，即得；S2、在全蛋白质样品中加入浓度为10-200mM的氨基活性试剂，加入浓度为5-100mM的氰基硼氢化钠，在16℃-80℃条件下，封闭0.25-12h，得到底物蛋白；将溶液中尿素浓度稀释至2M或以下；S3、对封闭后的底物蛋白进行泛素链水解：底物蛋白中加入去泛素化家族酶，进行酶切，得到泛素化位点修饰处赖氨酸的ε氨基暴露的S3样品；所述去泛素化家族酶包括USP家族酶；所述USP家族酶包括USP1、USP2、USP4、USP5、USP6、USP7、USP8、USP9x、USP10、USP15、USP16、USP20、USP21、USP25、USP27x、USP28中的一种或多种；S4、用含有可富集标签试剂标记泛素化修饰赖氨酸的ε氨基位点，得到S4样品；S5、对S4样品进行蛋白水解酶进行酶切，得到S5样品；S6、对应S4中可富集标签的方式，将S5样品中标记的泛素化修饰肽段进行富集；其中，S4步骤中所述可富集标签的试剂为有生物素标签的氨基活性试剂，S6步骤中的富集标记肽段的材料为链霉素亲和素基质材料。

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