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龙图腾网恭喜华中科技大学同济医学院附属协和医院申请的专利一种基于单细胞核转录组测序技术检测主动脉瓣膜破骨细胞的方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN117947152B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-03-21发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202410106058.8，技术领域涉及：C12Q1/6883；该发明授权一种基于单细胞核转录组测序技术检测主动脉瓣膜破骨细胞的方法是由李飞;徐力;郑一聃;钱兴宇;刘雨琦;董念国设计研发完成，并于2024-01-25向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种基于单细胞核转录组测序技术检测主动脉瓣膜破骨细胞的方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种基于单细胞核转录组测序技术检测主动脉瓣膜破骨细胞的方法，属于生物技术领域。步骤如下：收集主动脉瓣膜组织置于高糖培养基中保存，然后应用胶原酶工作液将组织裂解为单细胞悬液，随后采用细胞筛过滤非细胞成分，过滤后裂解细胞并分离细胞核，运用单细胞核转录组测序技术对细胞进行转录组检测。检测结果表明，相较于此前应用scRNA几乎没有捕获到瓣膜组织破骨细胞的结果，本方案在总共44000余个细胞核中捕获到了数千个可以被鉴定为破骨细胞或破骨细胞前体的细胞核，并获取了其平均测序深度为10X的转录组结果。此外，其他细胞的组成和比例均无显著变化，可说明该技术可靠。

本发明授权一种基于单细胞核转录组测序技术检测主动脉瓣膜破骨细胞的方法在权利要求书中公布了：1.一种基于单细胞核转录组测序技术检测主动脉瓣膜破骨细胞的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：获取主动脉瓣膜组织，将其置于培养基中保存；S2：使用胶原酶工作液对主动脉瓣膜组织进行裂解制备主动脉瓣膜组织单细胞悬液；S3：对制得的单细胞悬液采用细胞筛过滤非细胞成分，利用细胞核提取试剂盒裂解细胞，并采用差速离心法获取单细胞核悬液；S4：将单细胞核悬液采用单细胞核转录组检测系统进行snRNA检测，对测序结果应用cellranger进行上游质控和处理，应用R软件包Seurat和SCP进行下游分析；所述步骤S3中使用的细胞筛的孔径为100μm；所述差速离心法工艺为将3-5mL0.1-0.5molL蔗糖溶液放入离心管中，然后沿管壁小心地加入1-5mL悬液覆盖于上层；以500-1000×g离心5-15min，弃去上清，以2-8mL0.1-0.5molL预冷蔗糖溶液洗涤两次，每次500-1000×g离心10-20min，获得细胞核。

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