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龙图腾网恭喜江苏大学申请的专利一种基于上转换荧光循环扩增同时检测黄曲霉毒素和赭曲霉毒素的方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN114774521B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-03-14发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202210212662.X，技术领域涉及：C12Q1/6818；该发明授权一种基于上转换荧光循环扩增同时检测黄曲霉毒素和赭曲霉毒素的方法是由邹小波;李亚惠;张新爱;石吉勇;李艳肖;胡雪桃;张俊俊;王鑫设计研发完成，并于2022-03-04向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种基于上转换荧光循环扩增同时检测黄曲霉毒素和赭曲霉毒素的方法在说明书摘要公布了：本发明属于真菌毒素检测领域，具体涉及一种基于上转换荧光循环扩增同时检测赭曲霉毒素和黄曲霉毒素B1的方法；步骤为：首先制备上转换纳米材料，然后进行上转换纳米材料的修饰，同时制备特定发射波长的AuNRs溶液，最后构建OTA和AFB1特异性检测体系，根据荧光光谱信息和浓度建立预测模型；通过检测样品待测液的荧光光谱信息，即可实现样品中AFB1和OTA的同时检测；本发明能够对两种目标物同时检测，操作简便，并具有高灵敏度和高选择性。

本发明授权一种基于上转换荧光循环扩增同时检测黄曲霉毒素和赭曲霉毒素的方法在权利要求书中公布了：1.一种基于上转换荧光循环扩增同时检测黄曲霉毒素和赭曲霉毒素的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一，上转换纳米材料的制备：（a）将氧化钇、氧化镱、氧化铒分别溶于三氟乙酸中，再加入氟化钠，得到的混合液A，将混合溶液A转移至含有油胺和1-十八烯的容液中；持续充入氮气并进行磁力搅拌，加热反应后冷却至室温；然后加入环己烷和乙醇的混合液进行离心洗涤；离心所得沉淀再用纯净水离心清洗，最后经冷冻干燥得到上转换纳米材料，记为UCNPs1；（b）与步骤（a）方法和参数条件相同，区别为将步骤（a）中的氧化钇、氧化镱、氧化铒替换为将氧化钇、氧化镱、氧化铥；最终得到上转换纳米材料，记为UCNPs2；步骤二，上转换纳米材料的修饰：（a）将步骤一所得UCNPs1溶解于异丙醇A中，然后依次加入蒸馏水和氨水，封口后搅拌，随后滴加入异丙醇B和正硅酸四乙酯的混合液，持续搅拌一段时间，再滴加入异丙醇C和3-氨丙基三乙氧基硅烷；滴加后停止搅拌，在室温下静置陈化，陈化后进行离心分离，再经冷冻干燥得到表面带有氨基修饰的上转换纳米颗粒，记为NH4-UCNPs1；（b）步骤（b）与步骤（a）的操作和参数条件均相同，区别是将UCNPs1替换为UCNPs2；最终得到表面带有氨基修饰的上转换纳米颗粒，记为NH4-UCNPs2；步骤三，特定发射波长AuNRs的制备：（a）将氯金酸溶液和十六烷基三甲基溴化铵溶液混合后，再加硼氢化钠溶液，搅拌一段时间后在一定温度条件下静置后，得到种子液；（b）将十六烷基三甲基溴化铵和油酸钠溶于去离子水A中，随后加入硝酸银，静置反应后得到混合液A；向混合液A中加入氯金酸溶液后搅拌至无色，再依次加入浓盐酸、抗坏血酸溶液，搅拌，得到混合液B；向混合液B中加入步骤（a）制备的种子液，搅拌后静置、离心，得到的沉淀产物重新溶于去离子水B中，得到特定发射波长的AuNRs溶液；步骤四，特异性检测体系的构建：（a）将步骤二所得NH4-UCNPs1加入PBS缓冲液A中进行超声溶解，得到NH4-UCNPs1溶液，加入戊二醛，置于摇床进行反应，经离心分离后的沉淀物重新超声分散于PBS缓冲液B中，再加入亲和素，震荡孵育，孵育后经冷冻干燥后的产物重新分散于PBS缓冲液C得到混合溶液A，最后加入待检物OTA对应的核糖核酸链，记为RNA1，孵育过夜，离心后得到的沉淀产物重新分散于PBS缓冲液D中，得到的混合溶液记为NH4-UCNPs1-RNA1；（b）与步骤（a）的操作和参数条件均相同，区别是将NH4-UCNPs1替换为NH4-UCNPs2，核糖核酸链RNA1替换为AFB1对应的核糖核酸链，即RNA2，最终得到产物NH4-UCNPs2-RNA2；（c）将步骤三中制备的AuNRs溶液分别加入到NH4-UCNPs1-RNA1和NH4-UCNPs1-RNA2中，得到混合溶液A和混合溶液B，均置于摇床内进行孵育，孵育后使用PBS缓冲液清洗，清洗后经离心，得到的产物分别记为产物A和产物B；再将产物A和产物B分别于分散于PBS缓冲溶液中得到两种荧光检测探针溶液，分别记为Probe-RNA1和Probe-RNA2；（d）选择两种碱基互补配对的DNA1-cDNA1和DNA2-cDNA2与一定浓度的OTA溶液和AFB1溶液混合；随后加入步骤（c）所得Probe-RNA1和Probe-RNA2；最后加入Rnase-H进行共同孵育，孵育后得到待测溶液，即构建OTA和AFB1特异性检测体系；步骤五，OTA和AFB1的检测：取步骤四中制备的待测溶液，梯度设置其中OTA和AFB1的浓度，并对已知OTA和AFB1浓度的待测溶液进行荧光光谱信息的采集，根据荧光光谱信息和浓度建立预测模型；步骤六，样品中OTA和AFB1的检测：参照GB5009.96-2016和GB5009.22-2016的方法，对样品进行处理，制备样品提取液；然后，向Probe-RNA1和Probe-RNA2中加入样品提取液，再加入Rnase-H共同孵育，孵育后得到样品待测溶液，采集样品待测溶液的荧光光谱；随后将所采集荧光光谱信息导入步骤五所建立预测模型；经过模型计算得到样品中OTA和AFB1的具体浓度值，实现样品中OTA和AFB1的同时检测。

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