恭喜南京工业大学郭凯获国家专利权
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龙图腾网恭喜南京工业大学申请的专利一种在微流场中利用多酶催化合成光学活性(R)-2-羟基-4-苯丁酸的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119177259B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-03-14发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411703675.2,技术领域涉及:C12P7/42;该发明授权一种在微流场中利用多酶催化合成光学活性(R)-2-羟基-4-苯丁酸的方法是由郭凯;王合永;胡玉静;赵明业;黄桂翔;吴文静;何长安;方正;朱宁设计研发完成,并于2024-11-26向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种在微流场中利用多酶催化合成光学活性(R)-2-羟基-4-苯丁酸的方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种在微流场中利用多酶催化合成光学活性R‑2‑羟基‑4‑苯丁酸的方法,首次建立了一种基于连续流的三步酶促反应工艺本发明以廉价的苯甲醛和丙酮酸为原料,通过醛缩酶、烯还原酶和酮还原酶的三级固定化酶催化反应,高效合成R‑HPB。通过将固定化酶分别应用于三个独立的流动模块,本发明克服了多酶级联中常见的化学不平衡及反应条件不兼容的问题。本发明为工业化生产R‑HPB提供了一种高效、经济的技术方案,同时拓展了酶催化合成高附加值化合物的应用领域。
本发明授权一种在微流场中利用多酶催化合成光学活性(R)-2-羟基-4-苯丁酸的方法在权利要求书中公布了:1.一种在微流场中利用多酶催化合成光学活性R-2-羟基-4-苯丁酸的方法,其特征在于,包括如下步骤:步骤S1:将醛缩酶、烯还原酶和酮还原酶利用树脂分别固定于第一反应器、第二反应器和第三反应器的管道中,根据待反应的苯甲醛的底物浓度,针对每个反应器进行单独条件优化,得到适宜的反应流速,使得每个反应器中对应的底物均能反应完全;步骤S2:将步骤S1所述第一反应器、第二反应器和第三反应器依次连接,将待反应的苯甲醛、丙酮酸、NADP+、NAD+和D-葡萄糖的混合溶液利用注射泵通入反应器中,实现三步连续流反应;其中,所述醛缩酶的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示,所述烯还原酶的氨基酸序列如SEQIDNO.2所示,所述酮还原酶的氨基酸序列如SEQIDNO.3所示;所述醛缩酶利用环氧树脂ES-103B固定于第一反应器中,所述烯还原酶利用环氧树脂ES-1固定于第二反应器中,所述酮还原酶利用环氧树脂LX-1000EP固定于第三反应器中,所述混合溶液的反应溶剂为PBS缓冲液与有机溶剂的混合物,所述有机溶剂为正庚烷、异辛烷、甲醇、乙醇、异丙醇、乙腈、二甲基亚砜中的任意一种或几种;其中,有机溶剂的体积小于等于反应溶剂总体积的百分之十。
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