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龙图腾网恭喜武汉大学申请的专利一种特异性酶切结合qPCR单碱基分辨定量检测DNA中尿嘧啶的方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN115725703B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-03-11发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202211552186.2，技术领域涉及：C12Q1/6851；该发明授权一种特异性酶切结合qPCR单碱基分辨定量检测DNA中尿嘧啶的方法是由袁必锋;季彤彤;谢能彬设计研发完成，并于2022-12-05向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种特异性酶切结合qPCR单碱基分辨定量检测DNA中尿嘧啶的方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种特异性酶切结合qPCR单碱基分辨定量检测DNA中尿嘧啶的方法，属于生物技术领域。本发明基于UdgX‑H109S能够识别并切割尿嘧啶U产生无嘌呤位点AP，无嘌呤核酸内切酶1APE1切割产生的AP位点，产生1个核苷酸间隙，导致Bst3.0DNA聚合酶的延伸停止。实时荧光定量PCRqPCR技术可以放大延伸产物的差异，进而直接检测特定位点尿嘧啶的含量。本发明方法灵敏度高，特异性好，操作简单，效率高，不仅可以用于低丰度生物样品中尿嘧啶的单碱基分辨率测定，同时为研究尿嘧啶在生物体中的功能提供了新方法。

本发明授权一种特异性酶切结合qPCR单碱基分辨定量检测DNA中尿嘧啶的方法在权利要求书中公布了：1.一种特异性酶切结合qPCR单碱基分辨定量检测双链DNA中尿嘧啶的方法，其特征在于：包含如下步骤：（1）合成包含目标位点的双链DNA标品链，将其链稀释成一系列不同浓度标品，利用DNA聚合酶延伸并进行qPCR，绘制CT值和DNA浓度的线性方程；（2）将待检测双链DNA样品均等分为两份，一份不用UdgX-H109S处理，另一份用UdgX-H109S处理；两份样品再使用APE1酶处理；其中，UdgX-H109S的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示；（3）两份DNA样品中分别加入DNA探针，用DNA聚合酶对两份DNA样品进行延伸；所使用的DNA探针一部分与目标DNA位点下游完全互补配对，另一部分用于后续的qPCR扩增；（4）得到的延伸产物进行qPCR，根据线性方程计算DNA中尿嘧啶的含量；未经UdgX-H109S处理的DNA样品，通过qPCR检测的是DNA的总量；经过UdgX-H109S处理的DNA样品，通过qPCR检测的是不含有U的DNA的量；待检测的DNA中特定位点尿嘧啶修饰水平用下述公式计算：尿嘧啶修饰水平U%＝（DNA的总量-不含有U的DNA的量）DNA的总量*100%。

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