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龙图腾网恭喜华南理工大学;广东赛烽医药科技有限公司申请的专利一种L-脯氨醇中痕量L-脯氨酸的检测方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN115932123B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-03-11发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202310174001.7，技术领域涉及：G01N30/02；该发明授权一种L-脯氨醇中痕量L-脯氨酸的检测方法是由刘美凤;毛辉达;姚力华;王端统;梁峰设计研发完成，并于2023-02-28向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种L-脯氨醇中痕量L-脯氨酸的检测方法在说明书摘要公布了：本发明属于分析领域，公开一种L‑脯氨醇中痕量L‑脯氨酸的检测方法。本发明采用衍生剂二碳酸二叔丁酯即，Boc‑酸酐在碱性条件下衍生化L‑脯氨醇与L‑脯氨酸，从而实现采用普通C18色谱柱进行L‑脯氨醇中痕量L‑脯氨酸分离测定。该方法具有衍生时间短、反应条件温和、操作简便、安全、准确，高效，重现性好，灵敏度高的特点，适用于L‑脯氨醇中L‑脯氨酸的快速检验。

本发明授权一种L-脯氨醇中痕量L-脯氨酸的检测方法在权利要求书中公布了：1.一种L-脯氨醇中痕量L-脯氨酸的检测方法，其特征在于包括如下步骤：1）称取L-脯氨酸对照品，用乙醇溶解，得到L-脯氨酸对照品储备液；2）取不同体积步骤1）所得L-脯氨酸对照品储备液，均分别加入Boc-酸酐溶液和氢氧化钠溶液，振荡，得到不同浓度衍生后L-脯氨酸对照品溶液，即不同浓度Boc-L-脯氨酸对照品溶液；3）将步骤2）配制的溶液进行高效液相色谱分析，得到Boc-L-脯氨酸峰面积积分值；以Boc-L-脯氨酸的浓度为横坐标，其相应峰面积积分值为纵坐标，绘制标准曲线，并计算得到回归方程；4）称取L-脯氨醇样品，加入Boc-酸酐溶液和氢氧化钠溶液，振荡，即得衍生后供试品溶液；5）将步骤4）配制的溶液进行高效液相色谱分析，得到Boc-L-脯氨酸峰面积积分值；将Boc-L-脯氨酸峰面积积分值代入步骤3）所得回归方程中，得到Boc-L-脯氨酸的进样浓度，经换算得L-脯氨酸的进样浓度；所述高效液相色谱分析条件如下：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，填充剂粒径为1.8~6μm；柱长为150~350mm；以磷酸水溶液为流动相A，乙腈为流动相B进行梯度洗脱；磷酸水溶液中磷酸体积含量为0.05~0.4%；检测波长190~240nm；柱温为25~40℃；流速为0.5~1.5mLmin；步骤2）所述Boc-L-脯氨酸对照品溶液中Boc-L-脯氨酸的浓度为0.9~46μgmL；步骤2）所述L-脯氨酸对照品储备液和Boc-酸酐溶液的体积比为0.1~5:（1~5）；步骤2）和步骤4）所述振荡的时间为5~30min；振荡后用乙醇水溶液定容；步骤2）和步骤4）所述乙醇水溶液的用量满足：使Boc-酸酐的浓度稀释到3~15mgmL；所述梯度洗脱的参数如表1：表1 时间，min 流动相A，%（VV） 流动相B，%（VV） 0 65-75 35-25 10 35-25 65-75 12 35-25 65-75 12.1 65-75 35-25 20 65-75 35-25 。

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