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恭喜北京大学现代农业研究院秦国臣获国家专利权

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龙图腾网恭喜北京大学现代农业研究院申请的专利一种检测植物体内水溶性维生素代谢物的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119147681B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-02-21发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411667770.1,技术领域涉及:G01N30/06;该发明授权一种检测植物体内水溶性维生素代谢物的方法是由秦国臣;孙洪潇;吉瑞雪设计研发完成,并于2024-11-21向国家知识产权局提交的专利申请。

一种检测植物体内水溶性维生素代谢物的方法在说明书摘要公布了:本发明属于材料分析检测技术领域,并具体公开了一种检测植物体内水溶性维生素代谢物的方法,其包括如下步骤:制备多种含有不同水溶性维生素代谢物的标准品储备液;稀释标准品储备液配制标准品溶液,将标准品溶液进行液相色谱串联质谱检测,以相应目标化合物定量离子峰的峰面积和对应目标化合物浓度为坐标系,绘制标准工作曲线;制备待测样品溶液,进行液相色谱串联质谱检测;根据待测样品溶液中目标化合物定量离子峰的峰面积和标准工作曲线,得出待测物中多种水溶性维生素代谢物的含量。本发明可以实现同时检测并定量植物中30种水溶性维生素类代谢物,灵敏度高,结果准确可靠,能够为研究植物中的水溶性维生素的代谢过程提供帮助。

本发明授权一种检测植物体内水溶性维生素代谢物的方法在权利要求书中公布了:1.一种检测植物体内水溶性维生素代谢物的方法,其特征在于,该方法包括如下步骤:步骤S100:制备多种含有不同水溶性维生素代谢物的标准品储备液,多种水溶性维生素代谢物包括硫胺素和硫胺素一磷酸和硫胺素焦磷酸和4-甲基-5-2-羟乙基噻唑和4-氨基-5-羟基甲基-2-甲基嘧啶和核黄素和黄素单核苷酸和黄素腺嘌呤二核苷酸和烟酸和烟酰胺和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸和1-甲基烟酰胺和烟酰甘氨酸和1-甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲酰胺和葫芦巴碱和泛酸和D-泛醇和吡多胺和吡哆醇和吡哆醛和5’-磷酸吡哆醛和生物素和脱硫生物素和叶酸和5-甲基四氢叶酸和5-甲酰四氢叶酸和氰钴胺和乳清酸和抗坏血酸;步骤S200:稀释标准品储备液配制标准品溶液,将标准品溶液进行液相色谱串联质谱检测,以水溶性维生素代谢物的相应目标化合物定量离子峰的峰面积为第一坐标,以对应目标化合物浓度为第二坐标,绘制标准工作曲线;步骤S300:取待测物制备待测样品溶液,将待测样品溶液进行液相色谱串联质谱检测,得到待测样品溶液中目标化合物定量离子峰的峰面积;步骤S400:根据待测样品溶液中目标化合物定量离子峰的峰面积和标准工作曲线,得出待测物中多种水溶性维生素代谢物的含量;所述液相色谱串联质谱检测中:液相色谱条件包括:流动相A为浓度为5~15mM的醋酸铵溶液,流动相B为甲酸含量0.05%~0.15%的甲醇甲酸混合溶液,采用梯度洗脱;所述液相色谱条件中:色谱柱型号:WatersACQUITYUPLCHSST3,2.1×150mm,1.8μm,柱温30~40℃,流动相流速0.1~0.3mLmin,进样量1~3μL;洗脱梯度:0.0-3.0min,流动相A的体积百分含量为100%;3.0-7.0min,流动相A的体积百分含量由100%匀速变为5%;7.0-11.0min,流动相A的体积百分含量为5%;11.0-11.1min,流动相A的体积百分含量由5%匀速变为100%;11.1-15.0min,流动相A的体积百分含量为100%;质谱条件包括:采用HESI离子源、MRM扫描模式;所述质谱条件中的离子参数为:电喷雾电压为-30004000V,离子传输管温度350℃,汽化室温度350℃,鞘气35Arb,辅助气10Arb;所述质谱条件中的MRM扫描参数为: 化合物 StartTimemin EndTimemin Polarity Precursormz Productmz CollisionEnergyV RFLensV 硫胺素 0 15 Positive 264.967 121.967* 14.91 33 硫胺素 0 15 Positive 264.967 143.967 13.8 33 硫胺素一磷酸 0 15 Positive 344.883 121.883* 17.43 50 硫胺素一磷酸 0 15 Positive 344.883 125.8 28.86 50 硫胺素焦磷酸 0 15 Positive 424.883 121.883* 22.03 68 硫胺素焦磷酸 0 15 Positive 424.883 303.8 17.08 68 4-甲基-5-2-羟乙基噻唑 0 15 Positive 143.967 112.883* 23.9 52 4-甲基-5-2-羟乙基噻唑 0 15 Positive 143.967 125.883 18.5 52 4-氨基-5-羟基甲基-2-甲基嘧啶 0 15 Positive 139.967 80.883* 19.1 45 4-氨基-5-羟基甲基-2-甲基嘧啶 0 15 Positive 139.967 121.967 13.29 45 核黄素 0 15 Positive 377.05 171.967 39.16 72 核黄素 0 15 Positive 377.05 242.967* 23.69 72 黄素单核苷酸 0 15 Positive 456.967 358.883 22.34 89 黄素单核苷酸 0 15 Positive 456.967 438.883* 16.22 89 黄素腺嘌呤二核苷酸 0 15 Positive 785.883 347.883* 19.81 96 黄素腺嘌呤二核苷酸 0 15 Positive 785.883 438.967 24.87 96 烟酸 0 15 Positive 123.883 77.883 23.5 61 烟酸 0 15 Positive 123.883 79.883* 21.33 61 烟酰胺 0 15 Positive 122.883 77.883 24.11 56 烟酰胺 0 15 Positive 122.883 79.883* 20.82 56 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 0 15 Positive 663.967 427.8* 25.88 75 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 0 15 Positive 663.967 523.883 17.54 75 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸 0 15 Positive 743.883 135.883* 50.9 83 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸 0 15 Positive 743.883 603.8 19 83 1-甲基烟酰胺 0 15 Positive 136.883 91.967 21.88 55 1-甲基烟酰胺 0 15 Positive 136.883 93.967* 21.02 55 烟酰甘氨酸 0 10 Positive 180.883 78.883 40.18 51 烟酰甘氨酸 0 10 Positive 180.883 134.967* 17.49 51 1-甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲酰胺 0 15 Positive 152.967 107.883* 22.59 68 1-甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲酰胺 0 15 Positive 152.967 109.883 22.4 68 葫芦巴碱 0 15 Positive 137.967 91.883* 21.98 60 葫芦巴碱 0 15 Positive 137.967 93.883 21.48 60 泛酸 0 15 Positive 219.967 89.883* 14.55 39 泛酸 0 15 Positive 219.967 201.967 12.28 39 D-泛醇 0 15 Positive 205.967 75.967* 15.87 38 D-泛醇 0 15 Positive 205.967 187.967 13.74 38 吡多胺 0 15 Positive 168.967 133.883 22.34 31 吡多胺 0 15 Positive 168.967 151.967* 12.83 31 吡哆醇 0 15 Positive 169.967 133.883 22.09 38 吡哆醇 0 15 Positive 169.967 151.967* 13.59 38 吡哆醛 0 15 Positive 167.883 93.883 24.41 32 吡哆醛 0 15 Positive 167.883 149.883* 12.28 32 5’-磷酸吡哆醛 0 15 Positive 247.883 93.883 29.99 52 5’-磷酸吡哆醛 0 15 Positive 247.883 149.967* 17.25 52 生物素 0 15 Positive 245.05 96.883 33.21 39 生物素 0 15 Positive 245.05 226.967* 14.45 39 脱硫生物素 0 15 Positive 215.05 178.967 18.29 30 脱硫生物素 0 15 Positive 215.05 196.967* 13.39 30 叶酸 0 15 Positive 441.967 175.883 39.42 58 叶酸 0 15 Positive 441.967 294.967* 15.82 58 5-甲基四氢叶酸 0 15 Positive 460.133 179.967 41.45 54 5-甲基四氢叶酸 0 15 Positive 460.133 313.05* 20.04 54 5-甲酰四氢叶酸 0 15 Positive 473.967 298.967 32.45 63 5-甲酰四氢叶酸 0 15 Positive 473.967 326.967* 19.61 63 氰钴胺 0 15 Positive 678.3 146.967* 39.52 85 氰钴胺 0 15 Positive 678.3 358.883 23.4 85 乳清酸 0 15 Negative 154.883 41.883 25.98 30 乳清酸 0 15 Negative 154.883 110.883* 10.51 30 抗坏血酸 0 15 Negative 174.883 86.883* 19 38 抗坏血酸 0 15 Negative 174.883 114.883 19 38 *为定量子离子。

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