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龙图腾网恭喜中国科学院分子细胞科学卓越创新中心申请的专利利用多能干细胞建立具备双向分化潜能的肝干细胞系的方法及其应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN115216436B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-02-18发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202110413096.4，技术领域涉及：C12N5/071；该发明授权利用多能干细胞建立具备双向分化潜能的肝干细胞系的方法及其应用是由程新;陶伟龙;邓小刚设计研发完成，并于2021-04-16向国家知识产权局提交的专利申请。

本利用多能干细胞建立具备双向分化潜能的肝干细胞系的方法及其应用在说明书摘要公布了：本发明提供了利用多能干细胞建立具备双向分化潜能的肝干细胞系HepSC的方法及其应用，具体地，本发明提供了一种诱导人类多能干细胞分化为HepSC的方法，包括步骤：在培养体系中培养多能干细胞，从而获得功能性的HepSC，继续培养HepSC，可获得功能性的肝实质细胞或肝实质细胞群；和或胆管上皮细胞或胆管上皮细胞群。本发明的功能性的HepSC、肝实质细胞或肝实质细胞群；和或胆管上皮细胞或胆管上皮细胞群具有非常高的分化率和纯度，并且，本发明的HepSC、肝实质细胞或肝实质细胞群；和或胆管上皮细胞或胆管上皮细胞群可作为药物筛选的体外模型。

本发明授权利用多能干细胞建立具备双向分化潜能的肝干细胞系的方法及其应用在权利要求书中公布了：1.一种诱导多能干细胞分化为肝干细胞系HepSC的方法，所述的肝干细胞系是多能干细胞分化形成的，并且具有HNF4A+、SOX9+、AFP+、ALB-的表型，并且具备肝实质细胞和胆管上皮细胞的分化潜能，同时具备无限增殖能力，并且AFP表达在肝干细胞系中有异质性，所述肝干细胞系同时具备肝实质细胞和胆管上皮细胞的特征基因，其特征在于，包括步骤：a在第一培养条件下，在培养体系中培养多能干细胞，从而获得肝干细胞系；其中，所述培养体系包括：L-glutamine、AscorbicAcid、MTG、bFGF、EGF、VEGF、BMP4、A8301、CHIR99021；在步骤a中，包括步骤b1，在培养体系中培养多能干细胞，从而获得定型内胚层细胞；步骤b1中，所述培养体系为含有第二培养基和添加物的培养液，所述添加物包括L-glutamine、MTG、AscorbicAcid、bFGF、VEGF、ActivinA、CHIR99021、BMP4；并且所述第二培养基包括第二A培养基、第二B培养基和第二C培养基；所述第二A培养基包括RPMImedium1640，所述第二A培养基含有如下添加物：1X的L-glutamine、4.5×10-4M的MTG、10ngml的ActivinA和3uM的CHIR99021，并且在第1天到第2天，用第二A培养基进行培养；所述第二B培养基包括RPMImedium1640，所述第二B培养基含有如下添加物：1X的L-glutamine、50μgml的AscorbicAcid、4.5×10-4M的MTG、5ngml的bFGF、10ngml的VEGF、10ngml的ActivinA和0.25ngml的BMP4；并且在第2天到第4天，用第二B培养基进行培养；所述第二C培养基包括Serumfreemedium，所述第二C培养基含有如下添加物：1X的L-glutamine、50μgml的AscorbicAcid、4.5×10-4M的MTG、5ngml的bFGF、10ngml的VEGF、10ngml的ActivinA和0.25ngml的BMP4；并且在步骤a中，包括步骤b2，在第一培养条件下，在培养体系中培养步骤b1获得的定型内胚层细胞，从而获得肝干细胞系，其中，所述培养体系包括：1X的L-glutamine、50μgml的AscorbicAcid、4.5×10-4M的MTG、10ngml的bFGF、10ngml的EGF、10ngml的VEGF、50ngml的BMP4、5μM的A8301、3uM的CHIR99021，所述第一培养条件含有第一培养基，所述第一培养基选自下组：RPMImedium1640、Serumfreemedium、Ham’sF12、或其组合。

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