恭喜苏州亿康医学检验有限公司王兴兴获国家专利权
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龙图腾网恭喜苏州亿康医学检验有限公司申请的专利一种多重取代扩增技术制备重复序列的封闭试剂的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN113444776B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-02-18发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202110778770.9,技术领域涉及:C12Q1/6844;该发明授权一种多重取代扩增技术制备重复序列的封闭试剂的方法是由王兴兴;万成;任军设计研发完成,并于2021-07-09向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种多重取代扩增技术制备重复序列的封闭试剂的方法在说明书摘要公布了:本发明提供了一种多重取代扩增技术制备重复序列的封闭试剂的方法,该方法包括:采用多重取代扩增技术对基因组DNA进行扩增;对扩增产物进行纯化后,打断至200‑300bp长度的DNA片段,所得产物即为重复序列的封闭试剂。利用本发明的方法制备重复序列的封闭试剂,可以规避现有技术方法存在的胎盘DNA不容易获得以及HAP柱分离法繁琐且费时费力的缺点。
本发明授权一种多重取代扩增技术制备重复序列的封闭试剂的方法在权利要求书中公布了:1.一种制备重复序列的封闭试剂的方法,该方法包括:采用多重取代扩增技术对基因组DNA进行扩增,对扩增产物进行纯化后,打断至200-300bp长度的DNA片段,所得产物即为重复序列的封闭试剂;该方法还包括提取基因组DNA的过程,按照以下方法提取基因组DNA:提取基因组DNA的时候加入核裂解液、蛋白酶K、SDS以使组织能够充分裂解,37℃-56℃消化12-16小时;3000-10000rpm离心5-15min将DNA分离;采用多重取代扩增技术对基因组DNA进行扩增过程按照以下操作进行:对样本进行裂解,中和后离心,加入扩增混合液,进行PCR扩增;扩增时PCR仪中设置30℃,8h;65℃,5min;热盖70℃;采用多重取代扩增技术对基因组DNA进行扩增过程中,采用以下引物:中度重复序列和或高度重复序列的引物;或将Cot-1DNA打断后作为随机引物;所述中度重复序列和或高度重复序列的引物包括Alu、Kpn、LINE家族中的各至少一种,所述的Alu的引物如SEQIDNo.1、SEQIDNo.2所示,所述的Kpn的引物如SEQIDNo.3、SEQIDNo.4所示,所述的LINE家族的引物如SEQIDNo.5、SEQIDNo.6所示;将Cot-1DNA打断后作为随机引物时,是将Cot-1DNA打断至20-40bp的小片段。
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