恭喜浙江省柑橘研究所姚周麟获国家专利权
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龙图腾网恭喜浙江省柑橘研究所申请的专利一种同时检测柑橘类果实中12种酚酸含量的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115616111B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-02-18发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211246176.6,技术领域涉及:G01N30/02;该发明授权一种同时检测柑橘类果实中12种酚酸含量的方法是由姚周麟;吴韶辉;林媚;张伟清设计研发完成,并于2022-10-08向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种同时检测柑橘类果实中12种酚酸含量的方法在说明书摘要公布了:本发明提供了一种同时检测柑橘类果实中12种酚酸含量的方法,属于化学分析技术领域。本发明提供的同时检测柑橘类果实中12种酚酸含量的方法,通过对柑橘类果实的果肉和果皮进行分离,分别提取、制备果肉样品溶液和果皮样品溶液,采用液相色谱‑质谱联用法检测,最终能同时检测12种酚酸,检测时间短,检出限低,准确度高。
本发明授权一种同时检测柑橘类果实中12种酚酸含量的方法在权利要求书中公布了:1.一种同时检测柑橘类果实中12种酚酸含量的方法,其特征在于,包括:步骤S1、样品溶液的制备:将柑橘果实的果皮和果肉分离,分别置于-80℃冰箱中冷冻备用;取适量果肉于离心管中,加入提取液后,混合、超声提取、离心,得到第一上清液及第一残渣;在残渣中再次加入提取液,混合、超声提取、离心,得到第二上清液及第二残渣;合并第一上清液及第二上清液,定容,有机滤膜过滤,即得果肉样品溶液;取适量果皮于离心管中,加入提取液后,混合、超声提取、离心,得到第三上清液及第三残渣;在残渣中再次加入提取液,混合、超声提取、离心,得到第四上清液及第四残渣;合并第三上清液及第四上清液,定容,过滤,即得果皮样品溶液;步骤S2、检测:采用液质联用法检测,分别精密吸取上述果皮样品溶液、果肉样品溶液及混合标准品溶液各1.0μL,注入液相色谱质谱联用仪,测定其中12种酚酸的含量,所述的12种酚酸为原儿茶酸、4-羟基苯甲酸、香草酸、香豆酸、阿魏酸、芥子酸、咖啡酸、对香豆酸、水杨酸、没食子酸、龙胆酸和肉桂酸;其中:液相色谱条件为:采用C18色谱柱进行分离,流动相A为体积百分比为2%~5%的甲酸水溶液,流动相B为甲醇;洗脱;进样量1.0μL;检测时间4min;柱温30℃~50℃;提取液为甲醇和甲酸的混合水溶液,其中甲醇、水、甲酸的体积比为70∶28∶2;色谱洗脱条件为:0-4min,流动相A和流动相B为比例为50:50;质谱检测条件为:采用多重反应监测的扫描方式下负离子检测模式,离子源为ESI源;离子喷雾电压为-4500V;离子化温度为550℃;气帘气为35psi;碰撞气压为9bar;离子源气体150psi;离子源气体255psi;入口电位-10.0V;单元出口电位-12V;每个待测化合物的质谱检测参数为:龙胆酸:mz153→108、CE=-30V、DP=-60V,mz153→109,CE=-18V,DP=-58V;没食子酸:mz169→125、CE=-20V、DP=-70V,mz169→79、CE=-32V、DP=-63V;对香豆酸:mz163.1→119.1、CE=-21V、DP=-46V,mz163.1→90.9、CE=-42V、DP=-180V;水杨酸:mz137→65.1、CE=-37V、DP=-56V,mz137→93、CE=-22V、DP=-50V;4-羟基苯甲酸:mz137.1→93、CE=-19V、DP=-30V,mz137.1→119.1、CE=-16V、DP=-30V;咖啡酸:mz179→134、CE=-35V、DP=-56V,mz179→135、CE=-25V、DP=-56V;香豆酸:mz139→51、CE=-15V、DP=-23V,mz139→95、CE=-14V、DP=-22V;阿魏酸:mz193.2→134、CE=-21V、DP=-50V,mz193.2→178.1、CE=-18V、DP=-72V;原儿茶酸:mz153→90.9、CE=-35V、DP=-55V,mz153→109、CE=-22V、DP=-50V;芥子酸:mz223.1→208、CE=-18V、DP=-70V,mz223.1→164.1、CE=-19V、DP=-70V;香草酸:mz167.1→152.1、CE=-16V、DP=-68V,mz167.1→108.1、CE=-30V、DP=-43V;肉桂酸:mz147→103、CE=-17V、DP=-38V,mz147→77、CE=-30V、DP=-35V;数据采集软件为SCIEXOS2.0软件。
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