恭喜中山市人民医院蔡闯获国家专利权
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龙图腾网恭喜中山市人民医院申请的专利一种清除衰老间充质干细胞的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115975920B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-02-18发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202310098202.3,技术领域涉及:C12N5/0775;该发明授权一种清除衰老间充质干细胞的方法是由蔡闯;季明芳;李付贵设计研发完成,并于2023-02-10向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种清除衰老间充质干细胞的方法在说明书摘要公布了:本发明具体公开了一种清除衰老间充质干细胞的方法。其主要包括以下步骤:细胞培养:取间充质干细胞,使用完全培养基进行常规培养及正常传代;预处理:当正常传代后的间充质干细胞密度长至50~60%时,在完全培养基中,加入20nM浓度的白藜芦醇,继续培养;三梯度分离液制作:使用分离液原液和生理盐水按1:5.667、1:3.156的体积比分别配置成密度为1.048gml、1.077gml的分离液,使用分离液原液和完全培养基按1:4.079的体积比配置成密度为1.063gml的分离液;密度梯度离心及细胞收集:依次将密度为1.077gml、1.063gml、1.048gml的分离液加入离心管中,并将预处理后的间充质干细胞的细胞悬液加入离心管中的分离液最上层,进行离心,至分离液中明显获得3种不同密度的细胞;清除衰老间充质干细胞。
本发明授权一种清除衰老间充质干细胞的方法在权利要求书中公布了:1.一种清除衰老间充质干细胞的方法,其特征在于包括如下步骤:1细胞培养:取间充质干细胞,使用完全培养基进行常规培养,当细胞生长至80%密度时,按1传3的比例进行正常传代;2预处理:当正常传代后的间充质干细胞密度长至50~60%时,在完全培养基中,加入20nM浓度的白藜芦醇,继续培养24小时;3三梯度分离液制作:使用分离液原液和生理盐水按1:5.667、1:3.156的体积比分别配置成密度为1.048gml、1.077gml的分离液,使用分离液原液和完全培养基按1:4.079的体积比配置成密度为1.063gml的分离液;4密度梯度离心及细胞收集:依次将密度为1.077gml、1.063gml、1.048gml的分离液加入离心管中,并将步骤2处理后的间充质干细胞的细胞悬液加入离心管中的分离液最上层,进行离心,至分离液中明显获得3种不同密度的细胞;5清除衰老间充质干细胞:根据不同密度细胞在离心管中的位置将衰老细胞分离出来;所述间充质干细胞来源为人体脐带间充质干细胞;所述完全培养基为:F12、2%的血替和2ngml的BFGF按体积比49000:1000:1混合;所述分离液原液为OptiPrepTM,所述OptiPrepTM的密度为1.320±0.001gmL;所述步骤4进行离心时,按2500rpm,升速4,降速0的速度,离心20~30分钟。
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