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申请/专利权人：天津大学浙江研究院(绍兴)
申请日：2024-09-06
公开（公告）日：2024-12-17
公开（公告）号：CN119144664A
专利技术分类：.无环的[2006.01]
专利摘要：本发明公开了一种利用生物合成法及化学合成法制备角鲨烷的方法，步骤为：1生物合成：1克隆活化角鲨烯合成酶基因ERG9以及Ura营养缺陷型基因leu2；将上述基因共同转化至菌株Sc027中，得到重组菌；2制备重组菌种子液；3种子液进行蛋白的诱导表达；在培养30h和54h时各添加终浓度为10gL的无水乙醇；在培养96小时，离心获得菌体，破壁，萃取，去除有机溶剂，获得角鲨烯；2化学合成：将乙醇加入到反应容器中，加入钯催化剂，在氢气氛，加入角鲨烯，反应，得到角鲨烷；产品收率在95.5％以上。本发明的方法，条件温和，污染更低，操作简单，收率高，产物分离纯化简单，产品纯度好，97.4％以上。
专利权项：1.利用生物合成法及化学合成法制备角鲨烷的方法，其特征是包括如下步骤：1生物合成：1克隆活化角鲨烯合成酶基因ERG9以及Ura营养缺陷型基因leu2；将所述基因ERG9和所述基因leu2共同转化至酿酒酵母工程菌株Sc027的感受态细胞中，得到重组菌；2接所述重组菌单菌落于SD-URA液体培养基中，培养12-24h,得到种子液；3将步骤2获得的种子液在SD-URA液体培养基，在10-50℃，转速为110-330rpm进行摇瓶发酵培养；在培养24h时添加终浓度为10gL的半乳糖进行蛋白的诱导表达；在培养30h和54h时各添加终浓度为10gL的无水乙醇；在培养96小时，离心获得菌体，破壁处理，用己烷萃取，旋蒸去除有机溶剂，获得角鲨烯；2化学合成：将乙醇加入到反应容器中，加入钯催化剂，将反应容器中的空气置换成氢气，加入所述角鲨烯，使角鲨烯溶解，在反应温度30-50℃下，反应，得到角鲨烷。
百度查询： 天津大学浙江研究院(绍兴) 利用生物合成法及化学合成法制备角鲨烷的方法
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