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摘要：本发明公开了一种用于金湖乌凤鸡品种鉴定的SNP位点组合、引物组合和方法，SNP位点组合包括JHWF1位点到JHWF6位点，采用本发明提供的SNP位点组合进行金湖乌凤鸡品种鉴定时，只要有一个SNP位点基因型不符合金湖乌凤鸡相应的基因型，即可完全排除该个体属于金湖乌凤鸡；全部6个SNP位点联合基因型判定为金湖乌凤鸡的概率为100％。这种方法操作简便，准确性高，可以有效打击市场假冒的金湖乌凤鸡产品。

主权项：1.金湖乌凤鸡品种的鉴定方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）提取待测鸡基因组总DNA；（2）根据SNP位点组合，利用对应的引物组合分别进行PCR扩增；SNP位点组合包括JHWF1位点到JHWF6位点：JHWF1位于NC_006089.5染色体2上第146907508位，其为T或C多态；JHWF2位于NC_006091.5染色体4上第56917457位，其为T或C多态；JHWF3位NC_006090.5染色体3上第65633891位，其为G或A多态；JHWF4位于NC_006091.5染色体4上第30288872位，其为A或G多态；JHWF5位于NC_006092.5染色体5上第32192886位，其为C或T多态；JHWF6位于NC_006094.5染色体7上第24390219位，其为T或G多态；各SNP位点的引物的核苷酸序列为：JHWF1-F：5’CCAGTAATATCGCTCCTTTTTCC3’JHWF1-R：5’GATCTGTTCAAGGACAGGAACC3’JHWF2-F：5’GGCAGCATCAAAAACAATGA3’JHWF2-R：5’GGGCATCAGTTTTGGTCAGA3’JHWF3-F：5’ATGCAGCTCTTTGCAAACCT3’JHWF3-R：5’AAGAGAGCTCCTTGCCCAGT3’JHWF4-F：5’ACAGAAAGGCAAATGCTGCT3’JHWF4-R：5’GTTGCATTTGTGCTGAGGAA3’JHWF5-F：5’AGAAAGGACTTGGTAATGTA3’JHWF5-R：5’ACACCTCAGAGGCACAAACC3’JHWF6-F：5’GGTCCCCCACTTTGGTTAAT3’JHWF6-R：5’TGCTTTGTTGTTGTGGTGCT3’；（3）将PCR扩增产物测序后、判断基因型；（4）如果SNP位点组合对应的基因型有一个不符合金湖乌凤鸡对应的基因型，则判定该个体不属于金湖乌凤鸡；如果6个SNP位点组合对应的基因型全部符合金湖乌凤鸡的基因型，则判定该个体属于金湖乌凤鸡，6个SNP位点JHWF1~JHWF6的基因型依次为CC、CC、GG、AA、CC、TT。

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