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摘要:本发明属于多糖技术领域,具体涉及一种银耳多糖,其结构式为:本发明还提供了所述银耳多糖在制备护肤品中的应用、在制备抑制黑色素瘤生成和或生长药物中的应用等。本发明的银耳多糖具有较好的美白活性和或抑制弹性蛋白酶活性,能够在护肤品中应用,还能够抑制黑色素瘤生长,可用来制备药物。
主权项:1.一种银耳多糖在制备抑制黑色素瘤生成和或生长药物中的应用,其特征在于,其结构式为: 所述银耳多糖的制备方法,包括以下步骤:1将干制的银耳子实体粉碎后过60目筛,得到银耳干粉;将银耳干粉与蒸馏水按料液比1∶60gml的比例搅拌均匀,加热煮沸2h得到多糖粗提液;待粗提液冷却至室温后,以5000rmin的转速离心5min,取上清液旋转蒸发至原上清液体积的110;后于浓缩液中加入其体积4倍体积浓度为95%乙醇溶液,搅拌5min后于4℃静置12h,沉淀冻干后得到银耳粗多糖CTP;2再将粗多糖CTP与蒸馏水按料液比1∶30gml的比例复溶,并于复溶液中加入其重量10%的质量浓度为10%的TCA溶液,调节pH值至2.5,最后将其置于4℃环境下,静置12h,使得蛋白质析出;然后,将溶液以5000rmin的转速离心10min,除去蛋白质沉淀,取上清液备用;往上清液中加入其14体积的AB-8大孔树脂,并置于50℃电磁搅拌器中,以1000rmin的速度搅拌2h进行脱色;脱色结束后进行抽滤,除去大孔树脂,上清液于8000-14000Da的透析袋4℃透析3d,每隔6h换一次水;将透析后的上清液浓缩、醇沉、冻干后得到银耳精多糖RTP;3将精多糖多糖RTP配制成5mgmL的多糖溶液,过0.45μm的水性滤膜后使用离子交换柱对其进行分离,填料为DEAE-52纤维素,填料要先用蒸馏水浸泡后进行酸洗,再进行碱洗后进行装柱,后用超纯水洗至中性;先用超纯水按洗脱流速平衡好填料与洗脱液的接触面;以超纯水以及0.1M、0.3M、0.5M的NaCl溶液作为流动相进行梯度洗脱,流速为1.5mLmin,每管10mL,使用自动部分收集器收集洗脱液,用苯酚-硫酸法测定洗脱液糖含量,绘制对应的洗脱曲线,合并同一洗脱峰下的各管洗脱液,用蒸馏水透析3d,浓缩、冻干后得到单一洗脱峰的多糖样品;4将DEAE-52纤维素柱层析分离得到的单一洗脱峰组分,以超纯水复溶为5mgmL的多糖样液,并过0.45μm的水性滤膜;在490nm处用苯酚-硫酸法测量每根管的吸光度,并绘制了洗脱曲线,得到了一个唯一的洗脱峰,洗脱液浓度为0.5MNaCl溶液,将该峰下收集的洗脱液合并,浓缩、透析、冷冻干燥后获得分离纯化的银耳多糖TP组分;将DEAE-52纤维素柱层析得到的单一洗脱峰银耳多糖TP组分继续以SephadexG-200凝胶过滤柱洗脱,用0.5M的NaCl溶液以0.5mLmin的流速连续洗脱;收集每根管20min;同样,对单一洗脱峰组分进行合并收集洗脱液,透析、冻干后得到银耳多糖。
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百度查询: 广西壮族自治区农业科学院 西南林业大学 一种银耳多糖及其应用
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