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摘要：本发明涉及一种体外制造抗原特异性T淋巴细胞CellTrAg的新方法，该细胞用细胞内燃料标记并在载有抗原的单核细胞的存在下扩增，随后基于低强度的细胞内染料进行分类，其中低强度荧光是抗原特异性的标志，因为荧光损失与增殖强度相关。在功能测试中评估抗原特异性，该功能测试中基于低荧光而分选的抗原特异性淋巴细胞在分选过程中比具有高荧光的非特异性淋巴细胞更具活性；在调节性T淋巴细胞的情况下，活性被定义为抑制效应性淋巴细胞功能，而在效应性T淋巴细胞的情况下，活性被定义为增强这些细胞的特征，比如增殖、细胞因子和细胞毒性因子的产生。
主权项：1.一种制备用单克隆抗体标记并分选的抗原特异性T淋巴细胞的方法，其中，所述淋巴细胞：a通过使用载有抗原的自体CD14+单核细胞而产生；b使要产生的调节性T淋巴细胞或效应性T淋巴细胞悬浮在PBS中并用荧光染料在细胞内染色；c接着避光孵育淋巴细胞；d随后将淋巴细胞用培养基强力洗涤数次；e使用细胞内荧光染料染色的调节性T淋巴细胞或效应性T淋巴细胞与经伽马辐照的载有抗原的自体CD14+单核细胞悬浮在培养基中，其中所述自体CD14+单核细胞在对血液制剂进行辐照的标准条件下经受伽马辐照；f将调节性T淋巴细胞或效应性T淋巴细胞与CD14+单核细胞的共培养物与抗CD154和抗CD28抗体共同孵育；g将共培养物在培养基中孵育；和h将孵育后的抗原特异性T淋巴细胞基于低强度的细胞内染料进行分类，其中低强度的荧光是抗原特异性的标志，因为荧光损失与增殖强度相关。
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百度查询： 格但斯克医科大学 制造抗原特异性T淋巴细胞的方法
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