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摘要：本发明涉及微生物筛选技术，公开了一种电喷单乳液高通量筛选微生物菌株的方法及其应用。该方法包括：建立微生物突变体库，获得所述微生物突变体库的培养液；将所述培养液与含有凝胶剂的溶液混合得到分散液，将所述分散液进行电喷形成单分散液滴；将所述单分散液滴与含交联剂的收集液接触固化形成微球，将所述微球经培养后进行微流控分选；其中，所述凝胶剂与所述交联剂相接触能够发生交联固化反应。该方法无需使用油相生成单包裹液滴，荧光染色和筛选过程更加简便，有效提高对菌株筛选的有效性和准确性。
主权项：1.一种电喷单乳液高通量筛选微生物菌株的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：S1、建立微生物突变体库，获得所述微生物突变体库的培养液；S2、将所述培养液与含有凝胶剂的溶液混合得到分散液，将所述分散液进行电喷形成单分散液滴；S3、将所述单分散液滴与含交联剂的收集液接触固化形成微球，将所述微球经培养后进行微流控分选；其中，所述凝胶剂与所述交联剂相接触能够发生交联固化反应；步骤S1中所述培养液的OD600为0.5-0.7，步骤S2中所述培养液与所述含有凝胶剂的溶液的体积比为1:800-1200；所述含有凝胶剂的溶液中凝胶剂的浓度为1-3重量%，所述收集液中交联剂的浓度为2-5重量%；所述凝胶剂为海藻酸钠和或壳聚糖，所述交联剂为氯化钙和或氯化铁；所述微流控分选的过程包括：将培养后的所述微球进行荧光染色后，检测其荧光强度并设置荧光筛选阈值，利用分选芯片将荧光强度高于所述荧光筛选阈值的微粒分选出来；所述分选芯片设计为电动响应阀门分选芯片；所述电动响应阀门分选芯片包括电动分选芯片主体、位于所述电动分选芯片主体上的电动分选通道、与所述电动分选通道的侧壁连通的电动收集通道以及位于所述电动分选通道内的电动响应阀门，所述电动响应阀门位于所述电动收集通道与所述电动分选通道的连接处，以能够在所述电动分选芯片主体检测到所述微球的荧光强度高于所述荧光筛选阈值时，将所述电动响应阀门打开，以将该微球推入所述电动收集通道内。
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百度查询： 南京师范大学 电喷单乳液高通量筛选微生物菌株的方法及其应用
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