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摘要:本发明涉及一种诱导痰单细胞悬液及其制备方法和应用,所述制备方法包括如下步骤:获得待检测滤痰混悬液;低温离心;样本离心后去除上清液;往细胞沉淀,加不含钙、镁离子的DPBS,轻轻地用移液管混合,反复倒置管使细胞球团重新悬浮;过滤,收集滤过液;对上步骤的收集的滤过液进行低温离心,去除上清液而不破坏细胞沉淀;往上步骤细胞沉淀加适量不含钙、镁离子的DPBS,轻轻地用移液管混合;调整悬液体积以获得目标细胞浓度,即得单细胞悬液。本发明通过对诱导痰单细胞悬液进行制备,能够富集到大量的痰单细胞,使获得的诱导痰单细胞悬液可用于单细胞转录组测序,从而可以很好地检测痰细胞的基因表达情况,有助探究气道炎症发病机制及指导临床治疗。
主权项:1.一种诱导痰单细胞悬液的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:1获得待检测滤痰混悬液;2低温离心;3样本离心后去除上清液而不破坏细胞沉淀;5往细胞沉淀,加不含钙、镁离子的DPBS,轻轻地用移液管混合,反复倒置管使细胞球团重新悬浮;6过滤,用新的离心管收集滤过液;7对上步骤的收集的滤过液进行低温离心,去除上清液而不破坏细胞沉淀;8往上步骤细胞沉淀加适量不含钙、镁离子的DPBS,轻轻地用移液管混合,轻轻吹吸10-15次或直到细胞完全悬浮;9调整悬液体积以获得目标细胞浓度,即得单细胞悬液。
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百度查询: 广州医科大学附属第一医院(广州呼吸中心) 诱导痰单细胞悬液及其制备方法和应用
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