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摘要:本发明公开了思茅松松塔黄酮及多糖的提取方法,涉及到思茅松松塔技术领域,所述提取方法包括以下步骤;材料和试剂以及仪器的准备,两份松塔鳞片、70%乙醇、95%乙醇、芦丁标准品、5%亚硝酸钠溶液、10%硝酸铝溶液、4%氢氧化钠溶液、5%苯酚、浓硫酸、蒸馏水。本发明提高思茅松松塔资源的利用率,一定程度上促进思茅松松塔资源的利用,再对其深入研究,在最佳工艺条件下探究不同树龄思茅松松塔天然产物的含量,进一步优化了思茅松松塔资源的利用,可以根据思茅松的树龄来提高对思茅松松塔资源的利用,更加高效的提取出思茅松松塔的天然产物资源。
主权项:1.思茅松松塔黄酮及多糖的提取方法,其特征在于:所述提取方法包括以下步骤;步骤一:材料和试剂以及仪器的准备,两份松塔鳞片、70%乙醇、95%乙醇、芦丁标准品、5%亚硝酸钠溶液、10%硝酸铝溶液、4%氢氧化钠溶液、5%苯酚、浓硫酸、蒸馏水、粉碎机、回流装置、酒精灯、旋转蒸发仪、旋转蒸发仪、电子分析天平、若干烧杯、若干100mL容量瓶、若干50mL容量瓶、紫外分光光度计、量杯、圆底烧瓶、若干试管、恒温水浴锅;步骤二:松塔黄酮提取,所述松塔黄酮提取为在烧杯内加入70%乙醇和其中一份松塔粉末充分混合,再将其转移至回流装置中进行加热,回流一段时间后,趁热过滤,取滤液,后用旋转蒸发仪进行浓缩,浓缩至乙醇味不明显,最后得思茅松松塔黄酮提取液;步骤三:黄酮标准溶液制备,所述黄酮标准溶液制备为称取芦丁标准品0.01g,置于100mL容量瓶中,用70%乙醇定容至刻度线,得到0.1gL的芦丁标准品溶液,从芦丁标准品溶液的容量瓶中吸取0.00mL作为空白对照、2.00mL、4.00mL、6.00mL、8.00mL、10.00mL、12.00mL已配置好的芦丁标准液,分别加入至50mL容量瓶中,再加入70%乙醇溶液20mL,后依次加入5%亚硝酸钠溶液1.0mL,摇匀后静置6分钟,再加入10%硝酸铝溶液1.0mL,摇匀后静置6分钟,再加入4%氢氧化钠溶液10mL,以70%乙醇溶液定容至50mL,摇匀后放置15分钟,510nm处测定吸光度值A,以标准溶液浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线,计算线性回归方程,并绘制吸光度与浓度的标准曲线,得到回归线方程y=7.4196x-0.0066,R2=0.996;步骤四:黄酮标准溶液样品的测定;步骤五:松塔多糖提取,所述松塔多糖提取为称取另一份松塔粉末置于圆底烧瓶中,按料液比加入蒸馏水,在对应温度下加热浸提对应时间,水提后过滤,取滤液进行减压浓缩,浓缩至50mL,用5倍体积的95%的乙醇沉淀,在4℃下静置48h,后对提取液进行抽滤,取沉淀物,置于烘箱干燥,恒重,得思茅松多糖提取物;步骤六:多糖标准溶液制备;所述多糖标准溶液制备为称取葡萄糖标准品0.1g,置于100mL容量瓶中,加蒸馏水溶解并稀释至刻度线,摇匀,制成葡萄糖标准品溶液,分别移取标准葡萄糖溶液0.0mL、2.0mL、4.0mL、6.0m、8.0mL、10.0mL,并分别置于6只100mL容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度线,即得到质量浓度分别为0mgmL、0.02mgmL、0.04mgmL、0.06mgmL、0.08mgmL、0.10mgmL的系列标准葡萄糖溶液,分别吸取蒸馏水及系列标准葡萄糖溶液各1mL置于6只试管中,向0-6号试管中沿试管壁各加入5%苯酚1mL,再迅速加入5mL浓硫酸,摇匀后静置5分钟,然后置于40℃热水中水浴加热15分钟,冷却后在490nm波长下测定吸光度,以吸光度A为纵坐标,葡萄糖浓度C为横坐标,绘制葡萄糖标准曲线,得到回归线方程y=5.8729x+0.0079,R2=0.9976;步骤七:多糖标准溶液样品的测定。
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