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摘要：本发明公开了神经胶质瘤类器官的构建、培养方法及其完全培养基，由病人手术来源的神经胶质瘤组织样本，经过物理剪碎、酶解消化、红细胞裂解等组织处理过程，释放出肿瘤细胞团，再用完全培养基重悬置于二氧化碳培养箱中震荡培养。该组织处理过程简单易操作，流程短，培养过程不需要基质胶等细胞外基质的添加，避免了基质胶批次差异导致的难以标准化问题，且降低了培养成本。自主配置的完全培养基配方明确简单，能维持神经胶质瘤类器官较快的增殖速度和类器官形态以及长期传代培养。通过该方法构建的神经胶质瘤类器官，具有拟合度高、培养周期短、成本低、易于标准化且适合高通量应用等优点，很好地解决了神经胶质瘤类器官的建模问题。
主权项：1.神经胶质瘤类器官的构建方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤一，从手术切除中获得神经胶质瘤肿瘤样本，得到神经胶质瘤组织，然后将其放置在GDM培养基保持细胞的活性和稳定性，并于冰上运输；步骤二，将神经胶质瘤组织进行预处理，去除杂质，用冰冷的PBS洗涤，将预处理后的神经胶质瘤组织在冰上剪碎至0.5-1mm2大小；步骤三，将剪碎后的神经胶质瘤组织使用含1.5mgml的1型胶原酶、10μMY27632的AdvancedDMEMF12组织消化液重悬，置于CO2培养箱中37℃，5％CO2，140rmin进行消化，每隔10分钟使用移液器充分吹打，直至肿瘤细胞团充分释放；步骤四，肿瘤细胞团充分释放后，加入血清终止消化，然后以1000rmin，4℃离心并吸弃上清；步骤五，加入红细胞裂解液，去除红细胞，以1000rmin，4℃离心并吸弃上清，得到肿瘤细胞团。
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百度查询： 国科大杭州高等研究院 神经胶质瘤类器官的构建、培养方法及其完全培养基
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