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摘要：本发明公开了一种利用幼胚挽救技术获得羊草与新麦草远缘杂交后代的方法，包括以下步骤：1）杂交：羊草作为母本，新麦草作为父本；采集父本花粉，将花粉用镊子点在母本雌蕊柱头上进行授粉，并立即套袋；2）消毒：取授粉后的杂交穗，剥出未败育的子房，采用体积分数75%酒精浸泡1min，无菌水冲洗三次，次氯酸钠浸泡10min，后无菌水冲洗5次；3）采用一步成苗法或诱导愈伤扩繁、分化成苗法成苗；4）练苗移栽：组培苗生长至10cm‑15cm时，向培养瓶中加入超纯水，室内炼苗7d后，将植株根部培养基冲洗干净，移栽到灭菌营养土中培养。本发明具有较高幼胚萌发率、诱导愈伤率及分化率，在较短时间内获得羊草与新麦草的杂交后代。

主权项：1.一种利用幼胚挽救技术获得羊草与新麦草远缘杂交后代的方法，其特征在于包括以下步骤：1）杂交：羊草作为母本，新麦草作为父本；在母本散粉前24h，将穗顶部和基部小穗去掉，再将其余小穗的中间小花去掉，只留下最外面的两朵小花，然后去雄并套袋；采集父本的花粉，将花粉用镊子点在母本雌蕊柱头上进行授粉，并立即套袋；2）消毒：取授粉后的杂交穗，剥出未败育的子房，采用体积分数75%酒精浸泡1min，无菌水冲洗三次，10%vv次氯酸钠浸泡10min，后无菌水冲洗5次；3）采用一步成苗法或诱导愈伤扩繁、分化成苗法成苗；所述一步成苗法包括如下步骤：剥出杂交幼胚，放置于萌发培养基中，放置有杂交幼胚的萌发培养基放置在温度为25℃、光照16h、黑暗8h的培养箱培养28天，直接萌发发育成苗；所述萌发培养基包括4.4gLMS、30gL蔗糖、8gL琼脂及0.5mgL赤霉素，萌发培养基的pH值为5.8；所述诱导愈伤扩繁、分化成苗法包括如下步骤：剥出杂交幼胚，接种于诱导愈伤培养基，放置在温度25℃黑暗的培养箱中培养28天；采用诱导愈伤培养基，在诱导愈伤培养相同条件下继代增值培养14d后，转移到分化培养基中，置于25℃、光照16h、黑暗8h的培养箱中培养28d；转移到生根培养基中培养21天；所述诱导愈伤培养基包括4.4gLMS、30gL蔗糖、8gL琼脂、0.5mgL赤霉素、2mgL2,4-D及1mgL酵母提取物YE，诱导愈伤培养基的pH值为5.8；所述分化培养基包括4.4gLMS、30gL蔗糖、8gL琼脂、1.0mgL-2.0mgL赤霉素及0.5mgL-2mgL6-BA，分化培养基的pH值为5.8；所述生根培养基包括2.2gLMS、30gL蔗糖、8gL琼脂及1.0mgLNAA，生根培养基的pH值为5.8；4）练苗移栽：组培苗生长至10cm-15cm时，向培养瓶中加入超纯水，室内炼苗7d后，将植株根部培养基冲洗干净，移栽到灭菌的营养土中培养。

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百度查询： 中国农业科学院草原研究所 利用幼胚挽救技术获得羊草与新麦草远缘杂交后代的方法