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摘要:本发明涉及基因工程领域,特别是涉及一种用于枣组培苗上的瞬时转基因的方法。本发明通过构建含有GUS报告基因的pGreen62‑SK过表达载体,将其导入农杆菌,经农杆菌介导转化枣组培苗的步骤。在侵染过程选择用无菌注射器进行负压抽真空试验,将含有重组质粒的农杆菌瞬时转染至枣苗组织中,之后将农杆菌介导侵染的枣组培苗25℃黑暗放置24h,光下培养7天后检测报告基因的GUS染色效率,结果显示GUS基因在枣组培苗不同组织中显著过表达。可见,该体系的建立有利于将来对植物进行基因快速筛选和功能验证分析。本发明首次在枣组培苗中应用负压抽真空瞬时表达技术,为该技术在枣上的大规模应用奠定了基础。
主权项:1.一种用于枣组培苗上的瞬时转基因的方法,其特征在于,包括利用携带有报告基因和目的基因的根癌农杆菌悬浮液侵染外植体,之后将侵染后的外植体转移至继代培养基中进行培养的步骤;所述外植体包括枣组培苗、枣组培苗叶片和枣组培苗茎段。
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百度查询: 河北农业大学 一种用于枣组培苗上的瞬时转基因的方法
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