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摘要:本发明公开了一种UBE3D基因过表达的果蝇模型构建方法,构建出的果蝇模型能够长期持续稳定过表达UBE3D,该模型为探究年龄相关性黄斑变性的发病机制提供了材料,具有良好的应用前景。本发明操作简单,可稳定遗传,即可用于探究UBE3D影响线粒体结构和功能的潜在机制,也可为临床上治疗年龄相关性黄斑变性提供新的理论依据和候选的分子靶点。
主权项:1.一种UBE3D基因过表达的果蝇模型构建方法,其特征在于,包含如下方法步骤:其特征在于:1针对果蝇的UBE3D基因,通过人工合成的核苷酸序列如SEQIDNo.1所示;2将SEQIDNo.1所示的序列连接到pUAST-attB载体上,获得重组表达载体pUAST-attB-dUBE3D;3将步骤3制备的重组表达载体注射到果蝇新产出的去除卵壳的受精卵的尾部,注射完成后的卵放在25℃的湿盒中培养;4受精卵孵化成的幼虫待其羽化成成虫后与野生型果蝇杂交,挑取子代眼睛颜色为红色的果蝇即为带有UAS-dUBE3D转基因果蝇;5所得的转基因果蝇和双平衡子果蝇SpCyo;TM3TM6B杂交一代后自交,筛选得到可稳定遗传的UAS-dUBE3D果蝇;6将UAS-dUBE3D转基因果蝇与基因型为Mhc-GAL4,UAS-mitoGFP果蝇杂交,筛选得到过表达UBE3D的果蝇。
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权利要求:
百度查询: 重庆医科大学 一种UBE3D基因过表达的果蝇模型构建方法
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