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摘要：本发明公开了一种用于治疗口腔黏膜下纤维性变的水凝胶及其制备方法和应用，本发明属于外用口腔黏膜疾病治疗材料技术领域，具体涉及缓解口腔癌前状态之一‑口腔黏膜下纤维性变OSF水凝胶医用敷料，为载药PNS‑TanⅡA的多臂聚乙二醇骨架MMP‑9特异性多肽复合水凝胶。此外，本发明还提供了所述的水凝胶的制备方法和应用。本发明所述的复合水凝胶，创新地在多臂聚乙二醇骨架MMP‑9特异性多肽复合水凝胶中加入中药复合粒子PNS‑TanⅡA，具有促进口腔黏膜修复，治疗OSF从而预防口腔癌的潜能。

主权项：1.一种用于治疗口腔黏膜下纤维性变的水凝胶的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：S1三七总皂苷-丹参酮ⅡA水溶液的制备：S1.1溶剂沉积法使丹参酮ⅡA改性：S1.1.1将0.2g丹参酮ⅡA粉末溶于20ml无水乙醇中；S1.1.2向溶液中分散2g预胶化淀粉，在40-50℃水浴加热下恒速搅拌至溶液完全挥发；S1.1.3将产品置于恒温干燥箱中干燥至恒重；S1.1.4研磨物料至能全部通过80目筛，得到丹参酮ⅡA改性粒子；S1.1.5覆锡纸封口膜置于冰箱中备用，避光保存；S1.2配置冻干前驱液：用超纯水将1g三七总皂苷和上述丹参酮ⅡA改性粒子溶于小烧杯中制成冻干前驱液；S2冷冻干燥样品的预处理，冷冻阶段：S2.1将冻干前驱液倒入托盘，溶液高度约1mm；S2.2使用封口膜封住托盘口；S2.3将盛有冻干前驱液的托盘放入超低温冰箱冻存，-80℃，4h～12h；S3冷冻干燥机的使用，升华干燥阶段：S3.1打开干燥腔电源，等待20-30min至温度指示达到-40℃开始操作；S3.2从超低温冰箱中取出S2得到的样品，使用尖锐物品在封口膜上扎小孔；S3.3将其放入干燥腔，关闭干燥室连通大气的阀门，保证气密性良好；S3.4首先检查真空泵油位高低，确认正常后连接电源，然后开启干燥腔背后阀门，使其与真空泵连通，最后启动真空泵，等待20-30min，观察样品变化，确认无暴沸现象后，继续在干燥室内充分干燥12h；S4脱水及干燥后样品的存取，脱水阶段：S4.1关闭干燥腔背后与真空泵相连阀门，关闭真空泵，拔下真空泵电源；S4.2旋松气阀，使干燥腔内气压恢复至与大气相同；S4.3关闭冷冻室电源，拔下电源插座，取下有机玻璃罩；S4.4拿出干燥样品后，迅速覆上一层封口膜并用细线扎紧；S4.5清理整理仪器；S5配制含光引发剂LAP的PBS溶液：S5.1在电子秤上放置15ml烧杯、将15ml离心管放置在烧杯内，调零电子秤；S5.2使用100-1000μl移液枪吸取10mlPBS磷酸盐缓冲液于15ml离心管中，PBS磷酸盐缓冲液密度为1gml，电子秤读数为10g；S5.3计算配制10ml浓度0.05wt％LAP的PBS磷酸盐缓冲液所需LAP为5mg；S5.4使用分析天平称量5mgLAP后将其加入装有PBS磷酸盐缓冲液的15ml离心管，将振荡器调至自动模式，转速设置为800rpm，将15ml离心管放置在振荡器上振荡混匀5分钟，得到10ml浓度0.05wt％LAP的PBS磷酸盐缓冲液，用锡箔纸包住离心管，放入含冰袋的泡沫纸盒中备用；S6配制含PEG聚合物的PBS溶液、含MMP-9特异多肽的PBS溶液：S6.1使用分析天平称量50mg的4-arm-PEG-NB聚合物粉末、7.93mg定制的MMP-9特异多肽粉末，分别置于1.5ml半圆柱底EP管中，保持前驱液中4臂PEG-a-NB聚合物浓度为10wtwt％，且保持4臂PEG-a-NB聚合物上烯键与MMP-9特异多肽上硫醇的比例为1:1；S6.2使用100-1000μl和10-100μl移液枪吸取342μl步骤一中配好的浓度0.05wt％LAP的PBS磷酸盐缓冲液加入装有4臂PEG-a-NB聚合物粉末的EP管中混匀；S6.3使用100-1000μl移液枪吸取100μl步骤一中配好的浓度0.05wt％LAP的PBS磷酸盐缓冲液加入装有定制MMP-9特异多肽粉末的EP管中混匀；S6.4将振荡器调至自动模式，转速设置为800rpm，分别将2管溶液放置在振荡上振荡混匀5分钟，得到含4臂PEG-a-NB聚合物的PBS溶液和含有MMP-9特异多肽的PBS溶液；S7配制MMP-9酶响应水凝胶前驱液：S7.1使用100-1000μl移液枪吸取步骤二中配好的含4臂PEG-a-NB聚合物的PBS溶液于装有MMP-9特异多肽的PBS溶液的半圆柱底EP管中，混匀；S7.2将振荡器调至自动模式，转速设置为800rpm，将EP管放置在振荡器上振荡混匀5分钟，得到442μlMMP-9酶响应水凝胶前驱液；S8配制载药水凝胶前驱液：S8.1将PNS-TanⅡA溶于凝胶前驱液，且保证PNS-TanⅡA:凝胶前驱液为1mg:100μl；S9紫外灯光固化MMP-9酶响应水凝胶前驱液、保存：S9.1使用波长为365nm紫外灯在距离为1cm处照射MMP-9酶响应水凝胶前驱液30s，光固化为MMP-9酶响应载药水凝胶；S9.2将固化后的MMP-9酶响应载药水凝胶放置于干燥器皿内低温存储。

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