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一种贝莱斯芽孢杆菌的发酵工艺及其应用 

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摘要:本发明公开了一种芽孢杆菌的发酵培养基及其发酵工艺,涉及微生物发酵技术领域,所述贝莱斯芽孢杆菌为贝莱斯芽孢杆菌B31,保藏号CGMCCNO.24599。本发明选择8种常用于芽孢杆菌的培养基作为基础培养基,得到7号培养基为最优基础培养基,菌含量高达62×107CFUmL,芽孢量为88×107CFUmL。在7号培养基基础上添加不同比例菌糠粉,提高了芽孢可耐受高温能力和芽孢数量。在80L发酵罐上优化发酵条件后,芽孢数达到25~30×108CFUmL。在5000L发酵罐上优化发酵条件后,芽孢数达到60~70×108CFUmL。本发明提供的高效发酵工艺,具有发酵培养基简单、发酵成本低、发酵产品菌体量多的优点。

主权项:1.一种芽孢杆菌的发酵培养基及其发酵工艺,其特征在于,包括以下步骤:S1:备好以下实验材料:1菌种贝莱斯芽孢杆菌菌种;2培养基种子培养基:胰蛋白胨10g,酵母提取物10g,氯化钠5g、pH值7.0;发酵培养基:8种常用于芽孢杆菌发酵的培养基;S2:培养方法1菌种活化将保存的甘油菌菌种转接到LB固体培养基表面,并将培养基放置在37℃恒温培养箱培养24小时进行备用;2制备种子液取一环活化的菌种,接入体积为5mLLB培养基中,放入37℃恒温震荡摇床,转速180rmin,培养时间12小时;3摇瓶培养种子液以2%的接种量接入100mL各基础培养基中,37℃、180rmin振荡培养48h,采用平板菌落计数法测定发酵液中的菌含量,筛选其中发酵水平最高的培养基作为B31菌株的基础培养基;4发酵水平最高的培养基作为B31菌株的基础培养基,其分别按质量比0.5%,1%,2%比例加入菌康粉,震荡培养37℃、180rpm48小时,测定不同培养基的CFU和芽孢浓度,同时芽孢分别经过80℃、90℃、100℃处理10min,涂布法测定其存活率;5利用摇瓶优化培养基在80L发酵罐上进行进一步优化,培养基:玉米粉5gL、葡萄糖3gL、豆饼粉5gL、鱼粉3gL、菌糠粉0.5gL,调节装液量、接种量、转速、通气量及培养温度进行优化,B31菌株的发酵培养周期为24h;6对80L发酵罐优化的培养基和培养条件在5000L发酵罐上进行进一步验证,培养基:玉米粉5gL、葡萄糖3gL、豆饼粉5gL、鱼粉3gL、菌糠粉0.5gL,调节装液量、接种量、转速、通气量及培养温度进行优化,B31菌株的发酵培养周期为24h。

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