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摘要：本发明公开了一种LAPTM5基因稳定敲除的肝癌细胞系及其构建方法与应用。本发明首先设计了一种特异性靶向人LAPTM5的sgRNA，通过CRISPR‑Cas9技术成功敲除人肝癌细胞系HCC‑LM3的LAPTM5基因。通过Westernblot检测蛋白表达，证实敲除细胞构建的成功。同时，本发明通过实验验证了在正常培养条件下，LAPTM5敲除对于细胞的增殖和凋亡等过程无显著影响。本发明构建的HCC‑LM3‑LAPTM5敲除细胞系，通过抑制细胞自噬过程发挥生物学作用，该细胞系适用于基于自噬、耐药等基础临床交叉相关的研究。
主权项：1.一种用于肝癌细胞系中靶向敲除LAPTM5基因的sgRNA，其特征在于，所述sgRNA的合成引物包括序列如SEQIDNO：2所示的正向引物和如SEQIDNO：3所示的反向引物。
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百度查询： 复旦大学附属中山医院 一种LAPTM5基因稳定敲除的肝癌细胞系及其构建方法与应用
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