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摘要：本发明涉及苯丙胺类毒品检测技术领域，具体公开了一种检测苯丙胺类毒品的分子印迹型SPR传感器的制备方法，制备步骤为：通过在盖玻片上沉积一层5nm的铬和50nm的金薄膜制备SPR芯片，然后经过充分洗涤干燥后利用香柏油的黏附作用安装在电化学‑SPR联用SPR系统的棱镜上，以3,4‑亚甲二氧基苯乙胺MDEA为模板分子、多巴胺DA为功能单体。该检测苯丙胺类毒品的分子印迹型SPR传感器的制备方法，通过电化学和SPR信号协同调节聚合膜厚度和均匀度，有效减少实验步骤；同时多巴胺具有较多的氨基和羟基基团，识别位点丰富，有效提高了传感器的检测灵敏度和选择性；对苯丙胺类毒品MDA、MDMA具有较好的检测效果，可耐受各种非法药物和其他物质的干扰。

主权项：1.一种检测苯丙胺类毒品的分子印迹型SPR传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、实验药品的准备实验所需药品有（±）3、4-亚甲二氧基苯丙胺MDA、（±）3、4-亚甲二氧基甲基苯丙胺MDMA、（±）-甲基苯丙胺MA、氯胺酮盐酸盐、吗啡、3,4-亚甲二氧基苯乙胺盐酸盐MDEA化学纯度为95%、盐酸多巴胺DA、蔗糖、甘露醇和抗坏血酸AA，所需工具有盖玻片长宽为18×18mm；S2、SPR芯片的制备与组装盖玻片经过充分清洗干燥后使用ATCORION连续溅射系统沉积一层5nm的铬和50nm的金，制成SPR芯片；将SPR芯片分别在丙酮、乙醇和新鲜食人鱼溶液中浸泡3min，用Mill-Q水充分洗涤并在氮气下干燥；通过香柏油的黏附作用将SPR芯片安装在SPR传感系统的棱镜上；当芯片和棱镜都安装在SPR仪器上后，固定样品池；S3、SPR芯片上MIPs纳米膜的电化学聚合及表征在以5mMDA为功能单体、5mMMDEA为模板分子的0.1molLPBS中，在-0.5~0.5V扫描范围内进行循环伏安扫描，合成MIPs纳米膜，在记录电化学信号的同时记录SPR共振角随聚合过程的变化，用于评估聚合程度，然后通过乙醇和醋酸混合溶液洗脱模板分子，它们体积比为9：1；为观察SPR芯片表面真实的修饰状态，分别用扫描电子显微镜SEM、原子力显微镜AFM和水接触角WCA对裸金膜、MIPs纳米膜和NIPs纳米膜修饰的SPR芯片形貌进行表征；S4、实验参数优化为获得分子印迹型SPR传感器的最佳分析性能，对影响SPR响应的主要参数：功能单体的种类、预聚合时间、电化学聚合的扫描圈数、洗脱时间和吸附时间进行优化；S5、分子印迹型SPR传感器检测ATS中的MDA和MDMA在检测目标物之前，在MIPs修饰的SPR芯片上加入1mL超纯水，记录共振角θ1；然后将100μL溶解在甲醇溶液中不同浓度的MDA或MDMA滴到SPR芯片上，室温下孵育30min；随后用超纯水反复清洗SPR芯片表面，并在1mL超纯水中记录共振角θ2；孵育前后的角度位移变化，Δθ=θ2-θ1，即为由MIPs纳米膜吸附目标物引起的真实角度变化；最后用洗脱液处理芯片表面，以供下一步使用；S6、分子印迹型SPR传感器的选择性测试通过测试分子印迹型SPR传感器对其它毒品分子以及药片辅料干扰物质对SPR共振角度的影响，与检测MDA和MDMA的信号进行对比，评估该传感器的选择性能，其中毒品分子的浓度与MDA和MDMA相同，药片辅料的浓度是MDA和MDMA浓度的5倍；非印迹型SPR传感器同样进行以上测试，用于排除非特异性吸附的影响；S7、分子印迹型SPR传感器稳定性和重现性测试通过测试由五个相同制备条件的SPR芯片和同一个SPR芯片经过5次洗脱重建的分子印迹型SPR传感器对含有1μmolLMDA样品的SPR响应，评估该传感器的重现性；通过测试不同存储时间下分子印迹型SPR传感器对含有1μmolLMDA样品的SPR响应评估该传感器检测信号的稳定性；S8、分子印迹型SPR传感器在实际样品中的检测选取10倍稀释的人血清蛋白样本和健康成人尿液样本，分别加入50μM、100μM和500μM的MDMA，制得含有ATS毒品的实际血清样本和尿液样本，进行加标回收实验，通过测量上述样品的SPR响应评估该传感器的实际应用能力。

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