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沙门菌膜孔蛋白OmpC及其在检测中的应用 

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摘要:本发明属于生物技术领域,公开了沙门膜孔蛋白OmpC及其应用,本OmpC蛋白通过原核表达系统大肠杆菌BL21DE3进行表达,由于用原核系统表达出的OmpC蛋白属于包涵体蛋白,所以我们根据包涵体蛋白的特性进行了多次纯化条件的摸索以及透析复性条件的摸索;最后将获得的蛋白作为Elisa检测板的包被抗原。本发明中蛋白的制备方法简单,成本低,容易大批量制备,可应用于ELISA检测方法中,应用前景好。

主权项:1.沙门膜孔蛋白OmpC的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、构建重组阳性转化子:以鸡白痢沙门菌ATCC9120的全基因组为模板扩增目的基因OmpC,将目的基因OmpC与质粒载体重组,后转化筛选得到重组阳性转化子;S2、目的蛋白的表达和纯化:将重组阳性转化子菌株培养进行IPTG诱导表达,诱导后的菌体沉淀重悬至含有8M尿素的缓冲液中,经破碎、过滤后纯化;所述IPTG诱导条件为:IPTG浓度100mM,诱导时间16h,诱导温度16℃;S3、透析复性:将纯化后的蛋白分别依次在含有6M,4M,2M,1M,0M的透析液的透析袋中进行透析,每4h换一次透析液,透析完成后即得沙门膜孔蛋白OmpC。

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