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摘要:本发明涉及生物技术领域,具体公开了一种基于RPA‑CRISPRCas12a体系检测肝片吸虫的试剂盒,包括基于肝片吸虫ITS2基因保守序列位置设计的一对RPA引物、Cas12a蛋白、基于ITS2基因保守位点设计的crRNA、CRISPRCas12a蛋白反应缓冲液、荧光探针、侧向流试纸条探针和CRISPR单系统检测试纸条;基于肝片吸虫ITS2基因保守序列所设计的RPA引物序列如SEQIDNO.1~14所示,基于ITS2基因保守位点设计的crRNA的核苷酸序列如SEQIDNO.15~20所示;本试剂盒不需要专业的实验室和昂贵的设备仪器,非常适合于在资源有限的地区或者条件简陋的实验室进行快速检测。
主权项:1.一种基于RPA-CRISPRCas12a体系检测肝片吸虫的试剂盒,其特征在于:包括基于肝片吸虫ITS2基因保守序列位置设计的一对RPA引物、Cas12a蛋白、基于ITS2基因保守位点设计的crRNA、CRISPRCas12a蛋白反应缓冲液、荧光探针、侧向流试纸条探针和CRISPR单系统检测试纸条;基于肝片吸虫ITS2基因保守序列所设计的RPA引物序列如SEQIDNO.1~14所示,基于ITS2基因保守位点设计的crRNA核苷酸序列如SEQIDNO.15~20所示;试剂盒中的荧光探针序列为5‘-6-FAM-TTATT-BHQ1-3’,其5‘端被6-羧基荧光素6-FAM修饰,3‘端被荧光猝灭基团BHQ1修饰;侧向流试纸条探针的序列为5‘-6-FAM-TTATT-Biotin-3’,其5’端被6-羧基荧光素6-FAM修饰,3‘端被生物素Biotin修饰。
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百度查询: 吉林大学 一种基于RPA-CRISPR/Cas12a体系检测肝片吸虫的试剂盒
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