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摘要：本发明公开了一种小鼠SMARCA4‑AID敲入模型的制备方法。利用In‑Fusion技术构建含有AIDtag序列的Donor载体；基于CRISPRCas9介导的基因编辑技术，通过将Donor载体、Cas9mRNA和gRNA显微注射小鼠受精卵，使AIDtag序列敲入小鼠基因组；将受精卵移植代孕鼠，并对出生的小鼠进行鉴定，再通过与野生型小鼠杂交，从而得到了表达SMARCA4‑AID融合蛋白的小鼠，即小鼠SMARCA4‑AID敲入模型。本发明具有操作周期短、效率高的优势，应用前景广阔。
主权项：1.一种小鼠SMARCA4-AID敲入模型的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：构建含有同源臂及AID标签序列的Donor载体，所述同源臂包括依据CRISPRCas9介导的基因编辑技术确定的SMARCA4基因靶位点以及设置该靶位点中的同义突变序列；利用显微注射技术将gRNA、Cas9mRNA和所述Donor载体共注射到小鼠受精卵，使AID标签序列敲入小鼠基因组；将经过注射后的受精卵进行体外培养，然后移植到代孕鼠中继续发育至幼鼠出生，得到基因组敲入有AID标签序列的F0代小鼠；将所述F0代小鼠与野生型小鼠杂交，或者将杂交所得后代继续配繁，得到表达SMARCA4-AID融合蛋白的小鼠，即小鼠SMARCA4-AID敲入模型。
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百度查询： 西北农林科技大学 一种小鼠SMARCA4-AID敲入模型的制备方法
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