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摘要:一种非诊断目的基于二硫化钼‑二茂铁@聚苯胺MoS2‑Fc@PANi纳米复合材料检测GP73的方法,将纳米金AuNPs修饰在丝网印刷电极SPE表面,再通过π‑π共轭和静电吸附作用固定GP73适配体,以二硫化钼‑二茂铁@聚苯胺MoS2‑Fc@PANi为载体,制备MoS2‑Fc@PANi‑GP73Apt信号探针,构建夹心型电化学适配体传感器。通过MoS2‑Fc@PANi中Fc的氧化还原特性,采用电化学工作站的DPV进行扫描,记录其峰电流,实现对GP73的检测。
主权项:1.一种非诊断目的基于二硫化钼-二茂铁@聚苯胺MoS2-Fc@PANi纳米复合材料检测GP73的方法,按以下步骤进行:步骤1:二硫化钼-二茂铁@聚苯胺-GP73适配体MoS2-Fc@PANi-GP73Apt信号探针的制备1二茂铁@聚苯胺Fc@PANi的制备:二茂铁Fc和聚苯胺PANi加入到乙酸CH3COOH溶液中,加入1-乙基-3-二甲基氨基丙基碳酰二亚胺EDC和N-羟基琥珀酰亚胺NHS,搅拌、离心、清洗,得Fc@PANi固体;2二硫化钼-二茂铁@聚苯胺MoS2-Fc@PANi的制备:二硫化钼MoS2倒入纯水中破碎,加入Fc@PANi固体,搅拌,离心,清洗,得MoS2-Fc@PANi溶液;3MoS2-Fc@PANi-GP73Apt信号探针的制备:将GP73适配体GP73Apt溶液和MoS2-Fc@PANi溶液均匀混合,孵育、离心、清洗,得MoS2-Fc@PANi-GP73Apt信号探针;步骤2:电极的修饰与生物传感界面的构建1将丝网印刷电极SPE置于稀H2SO4溶液中活化;2将活化后的SPE置于含有HAuCl4的溶液中,进行电沉积,得AuNPsSPE;3将GP73Apt滴加在AuNPsSPE表面,孵育、洗涤、吹干,得GP73AptAuNPsSPE;步骤3:GP73工作曲线的绘制1将GP73标准液滴加到GP73AptAuNPsSPE表面,孵育、清洗、吹干,得GP73GP73AptAuNPsSPE;2在GP73GP73AptAuNPsSPE上滴加MoS2-Fc@PANi-GP73Apt溶液,孵育、清洗、吹干,得到电极MoS2-Fc@PANi-GP73AptGP73GP73AptAuNPsSPE;3将工作电极浸入磷酸缓冲溶液PBS中,采用电化学工作站的DPV扫描,记录传感器的响应电流;4分别对不同浓度的GP73进行检测,记录峰值电流;根据传感器的电流响应值与GP73浓度的关系,绘制GP73的工作曲线,计算出该方法的最低检测限;步骤4:实际血清样本中GP73的检测1用实际血清样本制备的工作电极浸入到PBS溶液中,采用电化学工作站的DPV进行扫描,记录传感器的响应电流值;2根据步骤3所得到的工作曲线,计算得到所述实际血清样本中GP73浓度。
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