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摘要：本发明涉及基因工程领域。具体而言，本发明涉及一种基于PERV逆转录酶的先导编辑系统，以及通过该系统进行基因编辑的方法。更具体而言，本发明提供：1、一种使用PERV‑NC融合RNaseH结构删除并携带多个突变位点的PERV‑RT的先导编辑系统；2，一种融合截短型Csy4的pegRNAtCsy4‑pegRNA；3、一或多种处理细胞的小分子化合物及其组合；以提高先导编辑在哺乳动物中的效率。
主权项：1.一种用于靶向性修饰生物体基因组DNA序列的先导编辑系统，其包含：iaCRISPR核酸酶如CRISPR切口酶和或含有编码所述CRISPR核酸酶如CRISPR切口酶的核苷酸序列的表达构建体，和PERV逆转录酶或其功能性变体和或含有编码所述PERV逆转录酶或其功能性变体的核苷酸序列的表达构建体；或b先导编辑融合蛋白和或含有编码所述先导编辑融合蛋白的核苷酸序列的表达构建体，其中所述先导编辑融合蛋白包含CRISPR核酸酶如CRISPR切口酶和PERV逆转录酶或其功能性变体；和或ii至少一种pegRNA和或含有编码所述至少一种pegRNA的核苷酸序列的表达构建体，其中所述至少一种pegRNA从5’至3’方向包含先导序列、支架scaffold序列、逆转录模板RTT序列和引物结合位点PBS序列。
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百度查询： 江西农业大学 中国科学院遗传与发育生物学研究所 基于PERV逆转录酶的先导编辑系统
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