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摘要:本发明提供一种长江鲟人工繁殖方法,包括选择亲鱼、亲鱼配对、亲鱼培育、人工催产、人工授精、受精卵孵化和幼鱼培育。本发明采用精准控制亲鱼培育水温的方式来刺激亲鱼性腺发育,通过鉴定亲鱼的亲缘关系选用亲缘关系较远的亲鱼进行配对来克服近亲繁殖导致的种群退化问题,并利用人工授精、受精卵孵化和幼鱼培育技术解决现有长江鲟人工繁殖困难的问题,从而可以稳定、持续地供应长江鲟良种,满足长江鲟人工增殖放流的常年有效需求。
主权项:1.一种长江鲟人工繁殖方法,其特征在于,包括如下步骤:步骤1、选择亲鱼:挑选年龄大于6龄的长江鲟作为待检测的长江鲟个体;使用长江鲟性别标记引物对待检测的长江鲟个体的DNA样本进行PCR扩增,将PCR扩增后的产物在120V的电压下,于2%的琼脂糖凝胶上电泳30分钟得到电泳条带,当条带大小为529bp时待检测的长江鲟个体为雌性长江鲟,作为雌性亲鱼;当没有出现任何条带时待检测的长江鲟个体为雄性长江鲟,作为雄性亲鱼;其中,所述长江鲟性别标记引物包括第一引物和第二引物,所述第一引物的核苷酸序列为5’-TAAAGGGAGACGGCAGAT-3’,所述第二引物的核苷酸序列为5’-CAGGAAAGGCAAGGATGT-3’;步骤2、亲鱼配对:对所述雌性亲鱼和所述雄性亲鱼进行长江鲟亲缘关系的鉴定,获得亲缘关系鉴定结果;根据所述亲缘关系鉴定结果,制定长江鲟配对繁殖表;步骤3、亲鱼培育:在11月根据所述长江鲟配对繁殖表将雌性亲鱼和雄性亲鱼按照雌雄比例1-2:1-2放入培育池中培育并控制养殖密度≤5kgm3,10-30天后将培育池中的水温由6-12℃以0.1-0.3℃天的升温速率升至12-15℃,培育至次年5月得到待催产亲鱼;步骤4、人工催产:将所述待催产亲鱼按照雌雄比例1-2:1-2放入催产池中培育并控制养殖密度≤3kgm3,培育3-5天后,先对待催产亲鱼中的雄性亲鱼注射催产药物10-12h后进行取精得到精子,随后对待催产亲鱼中的雌性亲鱼进行取卵得到卵子;催产雄性亲鱼和催产雌性亲鱼的间隔时间不超过2天;步骤5、人工授精:将所述精子和卵子按照1-2:50的体积比混合,加水振荡混匀0.3-0.5分钟,弃去水,再重新向卵子中加入体积分数为1-2%的精子,加水振荡混匀1分钟,弃去水,得到受精卵;步骤6、受精卵孵化:将所述受精卵倒入体积百分含量为20-30%的滑石粉水溶液内,控制水温为18--20℃,缓慢搅动120分钟,其中每30分钟换一次滑石粉水溶液;再将其在水温为18--20℃、水流速度为0.15-0.25ms、溶解氧≥7mgL的条件下进行孵化,得到孵化后的幼鱼;步骤7、幼鱼养殖:将所述幼鱼转移至幼鱼养殖装置中进行11-13天的第一养殖,控制溶解氧的浓度≥7mgL;第一养殖结束后进行30-45天的第二养殖,每天向所述幼鱼投喂四次水蚯蚓,投喂时间分别为8:00、14:00、20:00、00:00,并每周一次在水蚯蚓中拌喂大蒜;第二养殖结束后进行第三养殖,第三养殖的第1-2天向所述幼鱼投喂质量比为10:1的水蚯蚓和商品饲料的混合物,第三养殖的第3-4天投喂质量比为8:2的水蚯蚓和商品饲料的混合物,第三养殖的第5-6天投喂质量比为6:4的水蚯蚓和商品饲料的混合物,第三养殖的第7-8天投喂质量比为5:5的水蚯蚓和商品饲料的混合物,第三养殖的第8-10天投喂质量比为4:6的水蚯蚓和商品饲料的混合物,第三养殖的第10-12天投喂质量比为2:8的水蚯蚓和商品饲料的混合物;第三养殖的第13-14天投喂质量比为1:10的水蚯蚓和商品饲料的混合物;第三养殖的第15天投喂商品饲料,得到长江鲟。
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百度查询: 中国长江三峡集团有限公司中华鲟研究所 一种长江鲟人工繁殖方法
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