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一种检测人间充质干细胞分化成软骨能力的方法 

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摘要:本发明提供了一种检测人间充质干细胞分化成软骨能力的方法,以选定的特定因子为靶基因,通过检测培养后的干细胞的目标基因的mRNA表达水平,实现了对干细胞分化成软骨能力的定量评价。相较于现有技术的方法,本发明的方法可实现快速的定量检测,准确度更高,重复性好,能够更真实的反应细胞的软骨分化能力,可用于干细胞的质量控制。

主权项:1.一种检测人间充质干细胞分化成软骨能力的方法,包括以下步骤:1铺板:培养的干细胞融合率达到75-85%时,消化,离心,重悬后计数,调整细胞密度,铺板;2诱导:铺板24h后细胞融合收缩成小球状时,更换诱导培养基,连续培养,取不同诱导时间点的样品,低温保存;3检测:提取样品RNA,逆转录为cDNA,以逆转录的cDNA为模板,使用实时荧光定量PCR对目标基因和内参基因进行扩增检测;4数据处理:同时测定样品中目标基因和内参基因的CT值,计算样品的目标基因相较空白样品的目标基因的相对表达倍数。

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