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申请/专利权人：杭州佳嘉乐生物技术有限公司
摘要：本发明提供了一种高效生产二氢槲皮素的方法，涉及植物成分提取技术领域。所述方法包括以下步骤：1糖基化复合酶酶解：将落叶松芯材粉碎，加入乙醇、糖基化复合酶进行酶解反应；2利用负压超声提取、抽滤，合并滤液，旋转浓缩；3加入盐酸‑石油醚溶液以及夹带剂，加热水解原位萃取；反应完后，冷却静置分液，旋干有机相，得到浸膏；4大孔树脂‑连续离交；5重结晶得到产品：将粗品溶于乙醇，加热至搅拌回流，降温、析晶，低温过滤，真空干燥，得到二氢槲皮素成品。本发明生产工艺简单、便捷，可规模化生产，提取率高，产品纯度高。
主权项：1.一种高效生产二氢槲皮素的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：（1）糖基化复合酶酶解：将落叶松芯材用粉碎机粉碎成粉末，加入乙醇，料液比为1:10-1:20，然后加入0.5-1.5wt%糖基化复合酶，在30-50℃、pH=5-8的条件下酶解反应3-5h；（2）负压超声提取：酶解完毕后，利用负压超声提取、抽滤，提取2-4次，合并滤液，旋转浓缩至15-12体积；（3）水解原位萃取：加入浓缩液体积的2-4倍体积的盐酸-石油醚溶液，以及0.1~0.5倍体积的夹带剂，75-85℃加热水解原位萃取2-3h；反应完后，冷却静置分液，旋干有机相，得到浸膏；（4）大孔树脂-连续离交：将浸膏用2-4倍体积的乙醇溶液溶解，过滤后上样至装有大孔树脂柱的连续离交设备过柱，用4-6BVh流速的80%乙醇洗脱，收集洗脱液，旋干溶剂得到粗品；（5）重结晶得到产品：将粗品按料液比1:10-1:20溶于乙醇，加热至85-95℃，搅拌回流0.5-1h，自然冷却至20-25℃，然后放入冷井中降温、析晶，低温过滤，真空干燥，得到二氢槲皮素成品；步骤（1）所述糖基化复合酶的组成为：纤维素酶80-90%、果胶酶10-20%；步骤（2）所述负压超声提取的压强为-0.01~-0.1Mpa，超声频率为40-60kHz，温度为30-60℃，提取时间为15-45min；步骤（3）所述夹带剂为正丁醇；步骤（3）所述盐酸-石油醚溶液的浓度为0.8-1.2molL；步骤（4）所述大孔树脂柱为D101、AB-8或LX158。
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