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申请/专利权人：吉林大学

摘要：本发明适用于医学美容技术领域，提供了一种负载改性微球的透明质酸基可注射凝胶制备方法，所述凝胶的制备方法如下：利用醛基改性的透明质酸钠与酰肼改性的透明质酸钠和微球表面的氨基之间发生的席夫碱反应制备复合凝胶。本发明通过在改性微球内部装载铜肽，从皮肤分子层面抑制胶原蛋白的降解，设计定时释放体系使复合凝胶同时具备抗氧化和刺激胶原蛋白再生的功效；通过生成两种可逆的动态键赋予凝胶优异的自愈合能力和良好的力学性能，使凝胶具备优越的即时填充效果；凝胶注射所需挤压力可调控，可有效降低材料注射的疼痛感，避免结节、血肿等不良反应。总的来说，本发明提供了一种新的治疗方案，弥补现有抗衰老材料的缺陷和不足。

主权项：1.一种负载改性微球的透明质酸基可注射凝胶制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤S1、将分子量≥1.8×106Da的化妆品级别高分子透明质酸钠溶于去离子水中，磁力搅拌至完全溶解，得到透明质酸钠溶液；步骤S2、向步骤S1所得溶液中依次加入固体形式的1-乙基-3-3-二甲氨基丙基碳二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺，磁力搅拌至完全溶解；步骤S3、将碳酰肼溶于去离子水中，磁力搅拌至完全溶解，加入到步骤S2的混合溶液中于室温下搅拌过夜；步骤S4、将步骤S3所得混合溶液用去离子水透析3天，并于-74℃下冷冻干燥12h，得到酰肼修饰的透明质酸钠；步骤S5、向步骤S1所得溶液中加入固体形式的高碘酸钠，于室温下黑暗环境中磁力搅拌5h，加入乙二醇停止反应；步骤S6、将步骤S5所得混合溶液用去离子水透析3天，并于-74℃下冷冻干燥12h，得到醛基修饰的透明质酸钠；步骤S7、将步骤S4和步骤S6所得冻干样品分别溶于去离子水中，磁力搅拌至完全溶解，得到前体溶液A与B；步骤S8、将端基为羧基、特性黏度为0.9～1.4dLg的左旋聚乳酸溶于有机溶剂中，得到左旋聚乳酸溶液；将聚乙二醇4000和蓝铜胜肽于25℃下溶于去离子水中，并于25℃、40kHZ下超声1min后作为W1；将聚乙烯醇于85℃下溶于去离子水中，冷却至室温后作为W2；将左旋聚乳酸溶液迅速倾倒入W1中，在冰水浴条件下进行均质，得到初乳；将所得初乳以1滴s的速度滴加到W2中，在冰水浴条件下进行均质，得到复乳；将所得复乳于25℃下磁力搅拌，除去有机溶剂，4000rpm下离心5min，用去离子水洗涤3次后，于-74℃下冷冻干燥12h，得到左旋聚乳酸载药微球；将聚赖氨酸溶于去离子水中，在25℃、500rpm磁力搅拌条件下将2mgmL左旋聚乳酸载药微球悬浮液以1滴s的速度滴加到聚赖氨酸溶液中，静置5min；去除上清液，加入去离子水重新悬浮微球后，再次沉淀，重复3次后，于-74℃下冷冻干燥12h，得到负载蓝铜胜肽的氨基改性左旋聚乳酸微球，微球粒径为10～40μm，微球壁厚为2～4.5μm；步骤S9、于室温条件下，将前体溶液A、B和氨基改性左旋聚乳酸微球充分搅拌混合，在84～104s内形成负载改性微球的透明质酸基可注射凝胶。

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