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申请/专利权人：山东阳成协盈生物技术有限责任公司
摘要：本发明涉及一种生产L‑乳酸的大肠杆重组菌株E.coliLac、构建方法及其应用，属于生物工程领域，所述大肠杆菌重组菌株E.coliLac的构建方法：所述方法为以大肠杆菌基因重组菌株E.coliXZ132为出发菌株，获得BcldhL基因，所述BcldhL基因的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示，使用λ同源重组的方法使BcldhL基因替换出发菌株基因组中的ldhA基因，获得菌株E.colipldhA::BcldhL；再使用BcldhL基因替换出发菌株基因中的ppsA基因，获得菌株E.colipldhA::BcldhL‑pppsA::BcldhL，在质粒pTrc99a上插入BcldhL基因，获得质粒pTrc99a‑BcldL；制作菌株E.colipldhA::BcldhL‑pppsA::BcldhL的化学感受态并转化质粒pTrc99a‑BcldhL，获得菌株E.colipldhA::BcldhL‑pppsA::BcldhL‑pTrc::BcldhL，重新命名为E.coliLac。本发明还提供利用所述菌株发酵制备L‑乳酸的应用，本发明通过过表达高酶活的L‑乳酸脱氢酶基因，大幅度提高了乳酸产量。
主权项：1.一种生产L-乳酸的大肠杆菌重组菌株E.coliLac，其特征在于，所述大肠杆菌重组菌株E.coliLac为E.colipldhA::BcldhL-pppsA::BcldhL-pTrc::BcldhL，所述E.colipldhA::BcldhL-pppsA::BcldhL-pTrc::BcldhL以大肠杆菌基因重组菌株E.coliXZ132为出发菌株，以SEQIDNO.1所示的L-乳酸脱氢酶基因替代出发菌株中的乳酸脱氢酶A，乳酸脱氢酶A基因简称ldhA基因，L-乳酸脱氢酶基因简称BcldhL基因；同时BcldhL基因替代出发菌株中的磷酸烯醇式丙酮酸合成酶，磷酸烯醇式丙酮酸合成酶基因简称ppsA基因，同时出发菌株中导入了含有Trc启动子过表达L-乳酸脱氢酶的质粒ptrc99A-BcldhL。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 山东阳成协盈生物技术有限责任公司 一种生产L-乳酸的大肠杆重组菌株E.coli Lac、构建方法及其应用
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