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申请/专利权人：山东福洋生物科技股份有限公司

摘要：本发明公开了一种同时生产赤藓糖醇和葡萄糖酸钠的方法，属于生物发酵技术领域。本发明公开的一种同时生产赤藓糖醇和葡萄糖酸钠的方法，通过在一个发酵设备中先进行赤藓糖醇发酵，再添加一定比例的葡萄糖氧化酶和过氧化氢酶将剩余葡萄糖转化为葡萄糖酸钠，实现了两种产品的同时生产，且两种产品的比例可以随酶添加时间点的调整进行控制。与单独生产两种产品相比，本发明将赤藓糖醇发酵时间从100h缩短到40‑50h，将葡萄糖酸钠发酵时间从20h缩短到10h左右，提高了生产效率。

主权项：1.一种同时生产赤藓糖醇和葡萄糖酸钠的方法，其特征在于，包括以下步骤：1赤藓糖醇摇瓶培养：在一级摇瓶中接入1mlOD＝5-10的解脂假丝酵母，于28-30℃、180-200rpm条件下培养20-24h，获得OD＝5-10的一级摇瓶种子；所述一级摇瓶体积为500ml，装有100ml摇瓶培养基；将一级摇瓶种子全部接种于二级摇瓶中，于28-30℃、180-200rpm条件下培养10-15h，获得OD＝10-15的二级摇瓶种子；所述二级摇瓶体积为5000ml，装有1500ml摇瓶培养基；2赤藓糖醇一、二、三级种子罐接种、培养：一级种子罐按照70％装液量加种子罐培养基灭菌，将二级摇瓶种子接种于一级种子罐中，接种量为3％，控制培养条件为：温度＝28-30℃、溶氧DO＝10％-20％，pH自然；培养至种子OD＝10-15时获得一级种子罐种子，转接二级种子罐；二级种子罐按照70％装液量加种子罐培养基灭菌，将一级种子罐种子接种于二级种子罐中，接种量为5％，控制培养条件为：温度＝28-30℃、DO＝10％-20％，pH自然；培养至种子OD＝10-15时获得二级种子罐种子，转接三级种子罐；三级种子罐按照70％装液量加种子罐培养基灭菌，将二级种子罐种子接种于三级种子罐中，接种量为10％，控制培养条件为：温度＝28-30℃、DO＝20％-30％，pH自然；培养至种子OD＝15-20时获得三级种子罐种子，转接发酵罐；3发酵罐接种、发酵：发酵罐按照70％装液量加发酵罐培养基灭菌，降温至30℃时接种三级种子罐种子，接种量为10％，控制发酵条件为：温度＝28-30℃、DO≥20％，pH不做控制；4添加双酶生产葡萄糖酸钠：发酵至40-50h，发酵罐内剩余葡萄糖含量＝150-180gL；按照葡萄糖氧化酶和过氧化氢酶的添加比例为1.5：1.8kgt葡萄糖向罐内添加葡萄糖氧化酶和过氧化氢酶；控制反应条件为：温度＝38-40℃、DO＝50％-70％，pH＝5.0-5.5；反应至罐内葡萄糖≤0.5gL时停止发酵；所述葡萄糖氧化酶酶活≥20000uml；所述过氧化氢酶酶活≥600000uml；5陶瓷膜、纳滤膜过滤：将得到的发酵液通过陶瓷膜除去菌体，通过纳滤膜除去寡糖，得到赤藓糖醇和葡萄糖酸钠澄清溶液；6色谱分离、结晶：将得到的赤藓糖醇和葡萄糖酸钠澄清溶液通过色谱设备进行分离；分离得到的赤藓糖醇溶液和葡萄糖酸钠溶液分别利用煮糖罐进行结晶，得到赤藓糖醇晶体和葡萄糖酸钠晶体。

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