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申请/专利权人:通威渔业科技有限公司
摘要:本发明公开了南美白对虾循环水养殖系统中滤料IMNV病毒的活性鉴别方法,属于IMNV病毒检测技术领域,包括以下步骤:样品预处理,得到PMA处理组和对照组;PMA处理组加入2mL的PMA溶液,对照组加入2mL的无酶水;将步骤二中的两组样品在室温下避光孵育10‑15min;使用卤素灯对孵育后的样品进行15‑25min的曝光处理;使用RNA提取试剂盒,对曝光后的PMA处理组和对照组进行RNA提取;使用IMNV核酸检测试剂盒,将步骤五中提取的RNA进行实时荧光PCR扩增,得到各样品的IMNV的CT值;根据各样品的CT值根据换算公式得到核酸浓度,若对照组IMNV浓度和PMA组IMNV浓度一致,则全部为活病毒;若对照组的IMNV浓度大于PMA组的IMNV浓度,则PMA组有部分是活病毒;如果PMA组IMNV浓度为0,则全部为死病毒。
主权项:1.南美白对虾循环水养殖系统中滤料IMNV病毒的活性鉴别方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤一、样品预处理,得到PMA处理组和对照组;步骤二、PMA处理组加入2mL的PMA溶液,对照组加入2mL的无酶水;步骤三、将步骤二中的两组样品在室温下避光孵育10-15min;步骤四、使用卤素灯对孵育后的样品进行15-25min的曝光处理;步骤五、使用RNA提取试剂盒,对曝光后的PMA处理组和对照组进行RNA提取;步骤六、使用IMNV核酸检测试剂盒,将步骤五中提取的RNA进行实时荧光PCR扩增,得到各样品的IMNV的CT值;步骤七、根据各样品的CT值根据换算公式得到核酸浓度,若对照组IMNV浓度和PMA组IMNV浓度一致,则全部为活病毒;若对照组的IMNV浓度大于PMA组的IMNV浓度,则PMA组有部分是活病毒;如果PMA组IMNV浓度为0,则全部为死病毒。
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