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申请/专利权人：中国农业大学
摘要：本发明提供一种番茄褪绿病毒载体pToCV‑1+2及其构建方法与应用。载体pToCV‑1+2的全序列由SEQIDNO:5‑7串联而成。利用本发明提供的载体pToCV‑1+2接种番茄30天后，对上部叶片进行核酸水平和蛋白水平检测，相较于健康植株，接种pToCV‑1+2载体的植株能检测到特异性目标条带；60天左右接种pToCV‑1+2载体的番茄植株叶片出现明显的褪绿症状，表明载体pToCV‑1+2可以有效侵染番茄植株。本发明可用于抗番茄褪绿病毒的茄科植物品种的筛选，还可以用于抗病植物种质资源的改良及遗传育种领域，具有良好的市场应用前景。
主权项：1.番茄褪绿病毒载体pToCV-1+2的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：1以载体pCass-RZ-ToCV-RNA1为模板，利用引物RNA1-F和NOS-R进行PCR扩增获得RNA1-NOS片段；2以载体pCass-RZ-ToCV-RNA2为模板，利用引物35S-F和RNA2-R进行PCR扩增获得35S-RNA2片段；3将扩增得到的RNA1-NOS片段和35S-RNA2片段与经过StuI和BamHI双酶切的载体pCass-RZ骨架连接，得到番茄褪绿病毒载体pToCV-1+2；其中，载体pCass-RZ-ToCV-RNA1是将番茄褪绿病毒基因组RNA1构建到载体pCass-RZ上得到的，载体pCass-RZ-ToCV-RNA2是将番茄褪绿病毒基因组RNA2构建到载体pCass-RZ上得到的；引物RNA1-F和NOS-R的序列分别如SEQIDNO:1-2所示，引物35S-F和RNA2-R的序列分别如SEQIDNO:3-4所示。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 中国农业大学 番茄褪绿病毒载体pToCV-1+2及其构建方法与应用
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